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SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料
貨號 | W752-100UL | 售價(jià)(元) | 580 |
規(guī)格 | 100μl | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
價(jià)格 |
W752-100UL |
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料 |
100ul |
580 |
產(chǎn)品簡介
本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃,使用前請放置到室溫充分溶解。
SYBR Green II核酸染料特點(diǎn)
1. 無毒性:屬花箐類染料,容易生物降解,無致癌毒性。
2. 靈敏度高:至少可檢出20pg ssDNA或RNA,高于EB染色法25~100倍。
3. 信噪比高:樣品熒光信號強(qiáng),背景信號低。
4. 操作簡單:與EB 一樣,在預(yù)制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30 分鐘
無需脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察。
5. 適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠電泳、聚丙
烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等;可用于ssDNA 或RNA 染色。
6. 使用方便:對分子生物學(xué)中常用的酶(如:Taq 酶、反轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒有抑制作
用。
7. 經(jīng)濟(jì):價(jià)格比銀染便宜。
SYBR Green II使用方法簡介
1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)
(1) 制膠時(shí)加入SYBR Green II 核酸染料。冷卻膠至50℃左右,每100mL膠中加入3~5μL SYBR Green II 10,000× 儲液,以此比例類推。
(2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
注意事項(xiàng): 此方法染色可以準(zhǔn)確確定核酸片段分子量,染料用量相對較少。1mL染料大約可以做300塊 100mL的膠。
由于SYBR Green II熱穩(wěn)定性較差,不能在熱的膠溶液中直接添加,需要等待溶液冷卻至50℃左右才能添加。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。
2.泡染法
(1) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
(2) 用pH 7.0~8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE 或TE),按照10000﹕1的比例稀釋SYBR Green II 10,000× 儲液,混勻,制成1× 染色液。
(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的1× 染色液浸沒凝膠。用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10~30分鐘,染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的1× 染色液輕輕地倒在膠板上,讓其均勻地覆蓋整個(gè)膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
注:用泡染法染色時(shí),可以精確確定核酸片段分子量。但染料用量較多。