產(chǎn)品簡介：

臺盼藍(lán)（Trypan Blue，CAS NO. 72-57-1）是一種藍(lán)色酸性染料，含有兩個(gè)偶氮發(fā)色團(tuán)。是一種較大、親水和四磺酸化的陰離子染料，普遍用于檢測細(xì)胞膜的完整性以及評估細(xì)胞的存活率。作為一種鑒定細(xì)胞存活的簡易方法，臺盼藍(lán)滲透進(jìn)入喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞將其染成藍(lán)色（通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡），而具有完整細(xì)胞膜的活細(xì)胞將染料排斥在外。因此，臺盼藍(lán)染色后，通過顯微鏡下觀察顏色的差異即可肉眼區(qū)分死細(xì)胞和活細(xì)胞，通過計(jì)數(shù)就可對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的計(jì)算。

臺盼藍(lán)染色細(xì)胞存活率檢測試劑盒（Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit）是一款簡易的細(xì)胞存活率檢測試劑盒，含實(shí)驗(yàn)所需的臺盼藍(lán)染色液和細(xì)胞重懸液，操作單快捷。

試劑盒組分 

組分 A: Cell Suspension Buffer 細(xì)胞重懸液       100ml

組分 B: 2×Trypan Blue Stain 2×臺盼藍(lán)染色液   10ml

使用方法

1.自備材料

1.1胰蛋白酶消化液

1.2血球計(jì)數(shù)板

1.3光學(xué)顯微鏡

2.細(xì)胞收集

對于懸浮細(xì)胞：1000~2000×g離心收集細(xì)胞，充分清洗后，棄上清，加入適量或1ml細(xì)胞重懸液將細(xì)胞沉淀重懸，制備成單細(xì)胞懸浮液。若有需要，可做適當(dāng)稀釋。

對于貼壁細(xì)胞：先用胰酶消化細(xì)胞，之后1000~2000×g離心收集細(xì)胞，充分清洗后，棄上清，加入適量或1ml細(xì)胞重懸液將細(xì)胞沉淀重懸，制備成單細(xì)胞懸浮液。若有需要，可做適當(dāng)稀釋。

3.臺盼藍(lán)染色

吸取100μl單細(xì)胞懸液到1.5ml離心管，加入100μl 2×臺盼藍(lán)染色液，輕輕混勻，室溫染色3min。

【注意】：一般情況染色3min足矣。某些情況可延長染色時(shí)間，但不宜超過10min。

4.細(xì)胞計(jì)數(shù)

吸取少量染色細(xì)胞到血球計(jì)數(shù)板內(nèi)，于普通光鏡10×物鏡下計(jì)數(shù)四個(gè)大格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)，壓線者數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右，分別記錄著色細(xì)胞（包括損傷細(xì)胞和死細(xì)胞）和未著色細(xì)胞（活細(xì)胞）。

【注意】：用移液槍加樣，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其完全覆蓋住整個(gè)小室。不宜過量或量太少。

【注意】：每個(gè)細(xì)胞樣品至少需數(shù)500個(gè)細(xì)胞，數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。

細(xì)胞存活率計(jì)算公式如下：

細(xì)胞存活率（活細(xì)胞率）：Viability（%）=（總細(xì)胞數(shù)目-總著色細(xì)胞數(shù)）/總細(xì)胞數(shù)× 100

【注意】：處于健康的對數(shù)生長期細(xì)胞，通常情況活細(xì)胞至少占到95%。

保存與運(yùn)輸方法

保存：2-8℃保存，1年有效。

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)

臺盼藍(lán)具有輕微的細(xì)胞毒性，操作過程中請注意防護(hù)，避免與身體的直接接觸

凋亡小體偶爾也有臺盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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