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Rhod-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針

貨號(hào) T0402 售價(jià)(元) 427.5
規(guī)格 50μg CAS號(hào) 129787-64-0
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貨號(hào)

名稱

規(guī)格

價(jià)格

T0402

Rhod-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針

50μg

427.5

T0403

Rhod-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針

5×50μg

1805

產(chǎn)品介紹

Rhod-2是一種可見(jiàn)光激發(fā)的高親和力Ca2+指示劑,與其他可見(jiàn)光激發(fā)熒光探針如Fluo-3/4相比,Rhod-2具有長(zhǎng)波長(zhǎng),更適用于檢測(cè)具有較高自熒光現(xiàn)象的細(xì)胞和組織內(nèi)鈣離子水平以及檢測(cè)由光感受器和籠鎖鈣離子螯合劑光激活導(dǎo)致的鈣離子釋放。

與紫外光激發(fā)的熒光探針相比,如Fura-2和Indo-1,可見(jiàn)光激發(fā)Ca2+探針具有以下特點(diǎn):1)可被大多數(shù)設(shè)備的激發(fā)器有效激發(fā),包括共聚焦激發(fā)掃描顯微鏡以及流式細(xì)胞儀等。2)具有更強(qiáng)的染料吸收性能,使得更低濃度的探針即可成功檢測(cè)Ca2+變化,從而降低了對(duì)活細(xì)胞的光毒性。3)Ca2+依賴性熒光強(qiáng)度增強(qiáng),對(duì)Ca2+變化水平檢測(cè)敏感度更高。4)降低樣品自熒光以及光散射的干擾。5)兼容光激活探針以及UV-激發(fā)試劑,因此更方便于多參數(shù)檢測(cè)。5)無(wú)光譜偏移。

 產(chǎn)品性質(zhì)

CAS號(hào)(CAS NO.):129787-64-0

分子式(Formula):C52H59N4O19Br

分子量(Molecular Weight):1123.9575

Ex/Em:549/ 578nm

溶解性(Solubility):溶于DMSO

存儲(chǔ)條件:-20 ℃避光保存。

使用說(shuō)明:

1) (可選)配制Pluronic F-127母液:100mg Pluronic F-127粉末中加入0.5ml DMSO,配制成20%(w/v)的DMSO母液。溶解過(guò)程需要在40-50℃加熱20-30min。溶液室溫保存,不要冷藏。如果有結(jié)晶析出,可以重新加熱后溶解,不影響使用。

 2)Hanks?balanced salt solution(HBSS,不含Ca2+, Mg2+)。

使用方法(本實(shí)驗(yàn)方案僅供參考,為得到最理想實(shí)驗(yàn)結(jié)果,需根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)情況優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。)

1)Rhod-2/AM儲(chǔ)存液的配制

利用高質(zhì)量無(wú)水DMSO溶解Rhod-2/AM配制成2-5mM的儲(chǔ)存液,該儲(chǔ)存液可分裝于-20℃避光干燥密封保存。每次使用前需回溫至室溫。

【注】:① 因?yàn)镽hod-2/AM在水中的溶解性和穩(wěn)定性較差,不可用水溶性緩沖液配制Rhod-2/AM儲(chǔ)存液。

② 溶解用的DMSO需要保證新鮮無(wú)水,否則將會(huì)導(dǎo)致AM 體水解,使熒光染料無(wú)法進(jìn)入細(xì)胞,影響實(shí)驗(yàn)效果。

2)Rhod-2/AM工作液的配制

利用合適緩沖液(如Hanks & Hepes )將Rhod-2/AM稀釋成1-10μM的工作液,具體稀釋方法如1 mM母液配制1 ml濃度為4 μM工作液,用1 ml 緩沖液稀釋4 μl 1mM母液即可,混勻。

【注】:① 典型工作液濃度為0.1-5μM,對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,我們推薦加載濃度4-5μM,具體的使用濃度需根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行優(yōu)化。為了避免過(guò)度加載造成細(xì)胞毒性,建議在取得有效結(jié)果的基礎(chǔ)上盡量使用最低探針濃度。

② Rhod-2/AM工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用,避免反復(fù)凍存。

3)(可選)如果Rhod-2/AM進(jìn)入細(xì)胞的效果不好,可向 Rhod-2/AM/DMSO 儲(chǔ)存液中加入適量20% Pluronic F127溶液,最終稀釋至其終濃度為0.02-0.05%,Pluronic F127 可以防止 Rhod-2/AM在緩沖液中聚合并能幫助其進(jìn)入細(xì)胞。

【注】:Pluronic F127可降低Rhod-2/AM的穩(wěn)定性,因此只建議在配制工作液時(shí)加入,不建議將其加入儲(chǔ)存液長(zhǎng)期保存。

4)取出預(yù)培養(yǎng)的細(xì)胞,除去培養(yǎng)基,使用緩沖液洗滌細(xì)胞3次。

【注】:如果使用含血清的培養(yǎng)基,血清中的酯酶會(huì)分解 AM 體,從而降低Rhod-2/AM進(jìn)入細(xì)胞的效果。另外含有酚紅的培養(yǎng)基會(huì)使本底值略微偏高,所以加工作液之前需盡量去除培養(yǎng)基殘留。

5)將 Rhod-2/AM工作液加入細(xì)胞,加入量以覆蓋細(xì)胞為準(zhǔn)。在37℃培養(yǎng)15-60min,然后除去Rhod-2/AM工作液。

【注】:關(guān)于孵育的時(shí)間,如果首次做實(shí)驗(yàn)不能確定,建議先孵育30min,看熒光效果:如果細(xì)胞死亡較多,適當(dāng)縮短時(shí)間;如果熒光強(qiáng)度太弱,適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間。

6)用不含探針緩沖液洗滌細(xì)胞 3 次,以充分去除殘留的Rhod-2/AM工作液。然后加入緩沖液覆蓋細(xì)胞。

7)37℃培養(yǎng)箱孵育約 20-30min,以確保 AM 體在細(xì)胞內(nèi)的完全去酯化作用。

8)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞。

      為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

產(chǎn)品相關(guān):

貨號(hào)

產(chǎn)品

規(guī)格

單價(jià)/

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1805

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427.5

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1805

TG201

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399

TG221

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1591.25

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845.5

T0405

Rhod-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針

5×50μg

2973.5

S8223

Acridine Orange 吖啶橙熒光素

1g

154

S8224

Chromomycin A3 色霉素A3

1mg

880

S8225

Chromomycin A3 色霉素A3

5mg

3080

T601

BCECF, AM  pH熒光探針

1mg

1650

WU057

Monensin Solution (1,000×) 莫能霉素溶液(1,000×

1ml

320

WU077

Monensin, Sodium Salt  莫能霉素(鈉鹽)

100mg

460

WU045

Brefeldin A (BFA, 5mg/ml)  布雷非德菌素A5mg/ml

200μl

410

WU065

Brefeldin A (BFA, 5mg/ml)  布雷非德菌素A5mg/ml

1ml

1500

WU085

Brefeldin A (BFA, Powder)  布雷非德菌素A(粉末)

5mg

1200

WU050

Brefeldin A (BFA, Powder)  布雷非德菌素A(粉末)

25mg

3500

WU060

Ionomycin, Free Base 離子霉素(游離酸)

1mg

535

WU070

Ionomycin, Free Base 離子霉素(游離酸)

5mg

1720

WU072

Ionomycin, Calcium Salt 離子霉素(鈣鹽)

1mg

535

WU074

Ionomycin, Calcium Salt 離子霉素(鈣鹽)

5mg

1720

WU055

Calcium Ionophore A23187鈣離子載體

1mg

320

WU056

Calcium Ionophore A23187鈣離子載體

5mg

1100

WU057

Calcium Ionophore 4-bromo-A23187 鈣離子載體

1mg

1200