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DAPI

貨號(hào) P4207 售價(jià)(元) 495
規(guī)格 10mg CAS號(hào) 28718-90-3
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

價(jià)格(元)

P4207

DAPI

10mg

495

P4208

DAPI (5mg/ml)

200μl

224.4

P4209

DAPI Stain即用型

10ml

99

P4210

DAPI Stain即用型

50ml

356.4

產(chǎn)品介紹

DAPI,也稱(chēng)DAPI dihydrochloride,是一種常用的核酸染料,可以和雙鏈DNA富含AT序列的小溝結(jié)合,產(chǎn)生比自身強(qiáng)20多倍的藍(lán)色熒光。和EB(ethidium bromide)相比,DAPI對(duì)雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI也可對(duì)RNA進(jìn)行染色,染色機(jī)理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發(fā)出熒光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm),DAPI-RNA具有較長(zhǎng)的最大發(fā)射波長(zhǎng)(500 nm),其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。

盡管DAPI不能通過(guò)活細(xì)胞膜,但可以通過(guò)提高濃度使之進(jìn)入活細(xì)胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用來(lái)檢測(cè)酵母線(xiàn)粒體DNA,葉綠體DNA,病毒DNA,Microplasm DNA以及染色體DNA。

DAPI典型的藍(lán)色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細(xì)胞生物學(xué)多色熒光標(biāo)記技術(shù),因此也常作為核酸和染色體的復(fù)染劑用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測(cè)等領(lǐng)域,其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

本產(chǎn)品為溶液,分為2種形式,濃度為5 mg/mL和即用型,即用型產(chǎn)品濃度已經(jīng)過(guò)優(yōu)化,確??梢詽M(mǎn)足各種常規(guī)染色的需要。另外提供粉末形式的DAPI供客戶(hù)選購(gòu)。

 產(chǎn)品性質(zhì)

 中文名稱(chēng)(Chinese Synonym) 4’,6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚二鹽酸鹽

英文名稱(chēng)(English Synonym)4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride

CAS號(hào)(CAS NO.)  28718-90-3

分子式(Molecular Fomular)  C16H17Cl2N5·2HCl

分子量(Molecular Weight)350.25

熒光光譜(Fluorescence Spectral)

DAPI的Ex/Em=340 nm/488 nm; DAPI-DNA的Ex/Em=358 nm/461 nm

使用方法

 1. 配制工作液:用雙蒸水或PBS稀釋母液,配制成所需要的工作的濃度(0.5-10 μg/mL)?!咀ⅲ杭从眯筒恍枰瞬僮鳌?/b>

2. 固定的細(xì)胞或組織染色:

對(duì)于固定的細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進(jìn)行。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行DAPI 染色。

a) 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片:加入適量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。

b) 對(duì)于懸浮細(xì)胞:至少加入待測(cè)染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。

c) 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。

d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)360 nm,發(fā)射波長(zhǎng)460 nm。

3. 活細(xì)胞或組織染色:

a) 細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量DAPI染色液,約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積,必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1 mL染色液,對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100 μL染色液。

b) 在37℃培養(yǎng)細(xì)胞 10~20 分鐘。

c) 用 PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。

d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)360 nm,發(fā)射波長(zhǎng)460 nm。

運(yùn)輸與保存方法

 冰袋運(yùn)輸,5 mg/mLDAPI儲(chǔ)存液于-20oC避光保存,1年有效。即用型的DAPI 染液于4℃避光保存,有效期6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

1)DAPI對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

2)熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。

3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4)低濃度的DAPI不容易穿透細(xì)胞膜。

5)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

產(chǎn)品相關(guān):

貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

價(jià)格

S8224

Chromomycin A3 色霉素A3

1mg

880

S8225

Chromomycin A3 色霉素A3

5mg

3080

T601

BCECF, AM  pH熒光探針

1mg

1650

S6103

Hoechst 33258

10mg

275

S6101

Hoechst 33258 Stain 即用型

10ml

418

S6201

Hoechst 33259 Stain即用型

50ml

324.5

S6221

Hoechst 33342

10mg

262.9

S6222

Hoechst 33342 Stain即用型

10ml

121

S6223

Hoechst 33342 Stain即用型

50ml

324.5

P9206

Propidium Iodide

10mg

196.9

P9206

Propidium Iodide Stain即用型

150T

165