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DAPI
貨號(hào) | P4207 | 售價(jià)(元) | 495 |
規(guī)格 | 10mg | CAS號(hào) | 28718-90-3 |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號(hào)
名稱(chēng)
規(guī)格
價(jià)格(元)
P4207
DAPI
10mg
495
P4208
DAPI (5mg/ml)
200μl
224.4
P4209
DAPI Stain即用型
10ml
99
P4210
DAPI Stain即用型
50ml
356.4
產(chǎn)品介紹
DAPI,也稱(chēng)DAPI dihydrochloride,是一種常用的核酸染料,可以和雙鏈DNA富含AT序列的小溝結(jié)合,產(chǎn)生比自身強(qiáng)20多倍的藍(lán)色熒光。和EB(ethidium bromide)相比,DAPI對(duì)雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI也可對(duì)RNA進(jìn)行染色,染色機(jī)理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發(fā)出熒光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm),DAPI-RNA具有較長(zhǎng)的最大發(fā)射波長(zhǎng)(500 nm),其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。
盡管DAPI不能通過(guò)活細(xì)胞膜,但可以通過(guò)提高濃度使之進(jìn)入活細(xì)胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用來(lái)檢測(cè)酵母線(xiàn)粒體DNA,葉綠體DNA,病毒DNA,Microplasm DNA以及染色體DNA。
DAPI典型的藍(lán)色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細(xì)胞生物學(xué)多色熒光標(biāo)記技術(shù),因此也常作為核酸和染色體的復(fù)染劑用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測(cè)等領(lǐng)域,其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
本產(chǎn)品為溶液,分為2種形式,濃度為5 mg/mL和即用型,即用型產(chǎn)品濃度已經(jīng)過(guò)優(yōu)化,確??梢詽M(mǎn)足各種常規(guī)染色的需要。另外提供粉末形式的DAPI供客戶(hù)選購(gòu)。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文名稱(chēng)(Chinese Synonym) 4’,6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚二鹽酸鹽
英文名稱(chēng)(English Synonym)4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride
CAS號(hào)(CAS NO.) 28718-90-3
分子式(Molecular Fomular) C16H17Cl2N5·2HCl
分子量(Molecular Weight)350.25
熒光光譜(Fluorescence Spectral)
DAPI的Ex/Em=340 nm/488 nm; DAPI-DNA的Ex/Em=358 nm/461 nm
使用方法
1. 配制工作液:用雙蒸水或PBS稀釋母液,配制成所需要的工作的濃度(0.5-10 μg/mL)?!咀ⅲ杭从眯筒恍枰瞬僮鳌?/b>
2. 固定的細(xì)胞或組織染色:
對(duì)于固定的細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進(jìn)行。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行DAPI 染色。
a) 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片:加入適量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。
b) 對(duì)于懸浮細(xì)胞:至少加入待測(cè)染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
c) 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)360 nm,發(fā)射波長(zhǎng)460 nm。
3. 活細(xì)胞或組織染色:
a) 細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量DAPI染色液,約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積,必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1 mL染色液,對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100 μL染色液。
b) 在37℃培養(yǎng)細(xì)胞 10~20 分鐘。
c) 用 PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。
d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)360 nm,發(fā)射波長(zhǎng)460 nm。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸,5 mg/mL的DAPI儲(chǔ)存液于-20oC避光保存,1年有效。即用型的DAPI 染液于4℃避光保存,有效期6個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1)DAPI對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
2)熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4)低濃度的DAPI不容易穿透細(xì)胞膜。
5)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品相關(guān):
貨號(hào) |
名稱(chēng) |
規(guī)格 |
價(jià)格 |
S8224 |
Chromomycin A3 色霉素A3 |
1mg |
880 |
S8225 |
Chromomycin A3 色霉素A3 |
5mg |
3080 |
T601 |
BCECF, AM pH熒光探針 |
1mg |
1650 |
S6103 |
Hoechst 33258 |
10mg |
275 |
S6101 |
Hoechst 33258 Stain 即用型 |
10ml |
418 |
S6201 |
Hoechst 33259 Stain即用型 |
50ml |
324.5 |
S6221 |
Hoechst 33342 |
10mg |
262.9 |
S6222 |
Hoechst 33342 Stain即用型 |
10ml |
121 |
S6223 |
Hoechst 33342 Stain即用型 |
50ml |
324.5 |
P9206 |
Propidium Iodide |
10mg |
196.9 |
P9206 |
Propidium Iodide Stain即用型 |
150T |
165 |
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