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AF594 Phalloidin 鬼筆環(huán)肽-AF594
貨號(hào) | LX2610 | 售價(jià)(元) | 4092 |
規(guī)格 | 300T | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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產(chǎn)品信息
貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
價(jià)格/元 |
LX2610 |
鬼筆環(huán)肽-AF594 AF594 Phalloidin |
300T |
4092 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)的結(jié)合阻止絲狀肌動(dòng)蛋白(微絲)的解離,穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu),從而破壞微絲的聚合-去聚合的動(dòng)態(tài)平衡。此特性使得肌動(dòng)蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度(CC)降至<1μg/mL,因此,可用作一種聚合促進(jìn)劑。此外,鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。
筆環(huán)肽-AF594標(biāo)記探針會(huì)選擇性地結(jié)合F-肌動(dòng)蛋白,一般在納摩爾濃度下使用,鬼筆環(huán)肽衍生物是非常方便的熒光探針,用于標(biāo)記、鑒定和定量甲醛固定和透化組織切片中的F-肌動(dòng)蛋白,細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。肌動(dòng)蛋白是一種球狀的,大約42kDa的蛋白質(zhì),幾乎存在于所有真核細(xì)胞中。 它也是最高度保守的蛋白質(zhì)之一,與藻類和人類不同的物種相差不超過20%。肌動(dòng)蛋白參與許多重要的細(xì)胞過程,包括肌肉收縮、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞分裂和胞質(zhì)分裂、囊泡和細(xì)胞器運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo),以及細(xì)胞連接和細(xì)胞形狀的建立和維持。
鬼筆環(huán)肽比肌動(dòng)蛋白單體更緊密地結(jié)合肌動(dòng)蛋白絲,導(dǎo)致肌動(dòng)蛋白亞基從絲狀末端解離的速率常數(shù)降低,基本上通過防止絲解聚來穩(wěn)定肌動(dòng)蛋白絲。此外,發(fā)現(xiàn)鬼筆環(huán)肽抑制F-肌動(dòng)蛋白的ATP水解活性。鬼筆環(huán)肽在細(xì)胞中以不同濃度起作用不同。當(dāng)以低濃度引入細(xì)胞質(zhì)時(shí),鬼筆環(huán)肽將較少聚合形式的細(xì)胞質(zhì)肌動(dòng)蛋白以及微絲蛋白聚集成聚集的肌動(dòng)蛋白聚合物的穩(wěn)定“島”,但它不會(huì)干擾應(yīng)力纖維,即厚的微絲束。鬼筆環(huán)肽的性質(zhì)是通過用熒光類似物標(biāo)記鬼筆環(huán)肽并用它們?nèi)旧?dòng)蛋白絲用于光學(xué)顯微鏡來研究F-肌動(dòng)蛋白在細(xì)胞中的分布的有用工具。鬼筆環(huán)肽的熒光衍生物已經(jīng)證明在定位活細(xì)胞或固定細(xì)胞中的肌動(dòng)蛋白絲以及在體外可視化單個(gè)肌動(dòng)蛋白絲方面非常有用。熒光鬼筆環(huán)肽衍生物已被用作高分辨率肌動(dòng)蛋白研究中的重要工具。
本品以1000×儲(chǔ)存液形式(溶于DMSO)提供,按照100μl/孔(96孔板),總共可做300T。
注意事項(xiàng):
鬼筆環(huán)肽 的分子量小,很容易通過細(xì)胞,不需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和TRITON X-100處理。毒性較大,戴上手套操作。
有幾種方法都能用來染色組織細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)的肌動(dòng)蛋白絲(F-actin)染色,其中,固定步驟在獲得可信且具代表性的細(xì)胞F-actin分布情況中至關(guān)重要。固定步驟基于實(shí)驗(yàn)自身需求來選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優(yōu)秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。
操作步驟
1.制備1X鬼筆環(huán)肽綴合物工作溶液:加入1μL1000X鬼筆環(huán)肽綴合物DMSO溶液至1 mL含1%BSA的PBS。
注意1:鬼筆環(huán)肽綴合物的未使用的1000X DMSO儲(chǔ)備溶液應(yīng)等分并儲(chǔ)存在-20℃,避光。
注意2:不同的細(xì)胞類型可能染色不同。 應(yīng)相應(yīng)地制備鬼筆環(huán)肽綴合物工作溶液的濃度。
2.染色細(xì)胞:
2.1執(zhí)行甲醛固定。 在室溫下將含3.0-4.0%甲醛的細(xì)胞在PBS中孵育10-30分鐘。
注意:避免使用任何含甲醇的固定劑,因?yàn)榧状紩?huì)在固定過程中破壞肌動(dòng)蛋白。 優(yōu)選的固定劑是不含甲醇的甲醛。
2.2用PBS沖洗固定的細(xì)胞2-3次。
2.3可選:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定細(xì)胞3至5分鐘,以增加滲透性。 用PBS沖洗細(xì)胞2-3次。
2.4將100μL/孔(96孔板)鬼筆環(huán)肽綴合物工作溶液加入固定的細(xì)胞,并在室溫下染色細(xì)胞20至90分鐘。
2.5在加上蓋玻片之前,用PBS輕輕沖洗細(xì)胞2至3次以除去過量的鬼筆環(huán)肽綴合物,然后在顯微鏡下進(jìn)行,密封和成像。
相關(guān)產(chǎn)品:
貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
價(jià)格/元 |
LX4520 |
FITC-Phalloidin FITC-鬼筆環(huán)肽 |
300T |
2006.4 |
LX2226 |
FITC-Phalloidin FITC-鬼筆環(huán)肽 |
1mg |
5199 |
LX4530 |
Phalloidin-Tetramethylrhodamine Conjugate TRITC-鬼筆環(huán)肽 |
300T |
2006.4 |
LX4540 |
鬼筆環(huán)肽-加州紅 Phalloidin-California Red Conjugate |
300T |
2006.4 |
LX3801 |
鬼筆環(huán)肽-iFluor? 350 Phalloidin-iFluor? 350 Conjugate |
300T |
2006.4 |
LX4801 |
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300T |
2006.4 |
LX6801 |
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300T |
2006.4 |
LX7801 |
鬼筆環(huán)肽-iFluor? 532 Phalloidin-iFluor? 532 Conjugate |
300T |
2006.4 |
LX8801 |
鬼筆環(huán)肽-iFluor? 594 Phalloidin-iFluor? 594 Conjugate |
300T |
2006.4 |
LX1710 |
鬼筆環(huán)肽-iFluor? 633 Phalloidin-iFluor? 633 Conjugate |
300T |
2006.4 |
LX2711 |
鬼筆環(huán)肽-iFluor? 647 Phalloidin-iFluor? 647 Conjugate |
300T |
2006.4 |
LX3712 |
鬼筆環(huán)肽-iFluor? 680 Phalloidin-iFluor? 680 Conjugate |
300T |
4092 |
LX4713 |
鬼筆環(huán)肽-iFluor? 700 Phalloidin-iFluor? 700 Conjugate |
300T |
4092 |
LX5714 |
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300T |
4092 |
LX5715 |
鬼筆環(huán)肽-iFluor? 790 Phalloidin-iFluor? 790 Conjugate |
300T |
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鬼筆環(huán)肽-AF350 AF350 Phalloidin |
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LX1610 |
鬼筆環(huán)肽-AF488 AF488 Phalloidin |
300T |
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LX0226 |
Amino-Phalloidin 氨基鬼筆環(huán)肽 |
1mg |
6199 |
LX1801 |
iFluor? 488 phalloidin iFluor? 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色) |
300T |
1857 |
LX2801 |
iFluor? 555 phalloidin iFluor? 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(橘色) |
300T |
1857 |
LX2800 |
Phalloidin 鬼筆環(huán)肽 |
1MG |
5299 |