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Phalloidin-California Red Conjugate 鬼筆環(huán)肽-加州紅
貨號 | LX4540 | 售價(元) | 2006.4 |
規(guī)格 | 300T | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
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產(chǎn)品信息
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
價格/元 |
LX4540 |
Phalloidin-California Red Conjugate 鬼筆環(huán)肽-加州紅 |
300T |
2006.4 |
產(chǎn)品簡介
鬼筆環(huán)肽是一種從鬼筆鵝膏中得到的有毒的環(huán)狀七肽,可以與纖維肌動蛋白絲非常特異的結(jié)合,并且具有很高的親和力。它能使肌動蛋白聚合物的臨界濃度降低到小于1μg/mL,因此,常作為一種聚合促進劑使用。該物質(zhì)可以被綠色熒光染料標記,從而作為標記物用于組織細胞培養(yǎng)、組織切片或無細胞系中的肌動蛋白標記。
鬼筆環(huán)肽的分子量小,很容易通過細胞,不需要對細胞進行冷丙酮和TRITON X-100處理。毒性較大,戴上手套操作。
鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)的結(jié)合阻止絲狀肌動蛋白(微絲)的解離,穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu),從而破壞微絲的聚合-去聚合的動態(tài)平衡。此特性使得肌動蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度(CC)降至<1μg/mL,因此,可用作一種聚合促進劑。此外,鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。
鬼筆環(huán)肽-加州紅標記探針會選擇性地結(jié)合F-肌動蛋白。以納摩爾濃度使用,鬼筆環(huán)肽衍生物是方便的探針,用于標記,鑒定和定量甲醛固定和透化組織切片中的F-肌動蛋白,細胞培養(yǎng)物或無細胞實驗。肌動蛋白是一種球狀的,大約42kDa的蛋白質(zhì),幾乎存在于所有真核細胞中。 它也是最高度保守的蛋白質(zhì)之一,與藻類和人類不同的物種相差不超過20%。 肌動蛋白是細胞中兩種細絲的單體亞基:微絲,細胞骨架的三個主要組分之一,以及微絲,是肌細胞中收縮裝置的一部分。 因此,肌動蛋白參與許多重要的細胞過程,包括肌肉收縮,細胞運動,細胞分裂和胞質(zhì)分裂,囊泡和細胞器運動,細胞信號傳導,以及細胞連接和細胞形狀的建立和維持。
本品以1000×儲存液形式(溶于DMSO)提供。按照100μl/孔(96孔板),總共可做300T。
操作步驟
1.制備1X鬼筆環(huán)肽綴合物工作溶液:加入1μL1000X鬼筆環(huán)肽綴合物DMSO溶液至1 mL含1%BSA的PBS。
注意1:鬼筆環(huán)肽綴合物的未使用的1000X DMSO儲備溶液應等分并儲存在-20℃,避光。
注意2:不同的細胞類型可能染色不同。 應相應地制備鬼筆環(huán)肽綴合物工作溶液的濃度。
2.染色細胞:
2.1執(zhí)行甲醛固定。 在室溫下將含3.0-4.0%甲醛的細胞在PBS中孵育10-30分鐘。
注意:避免使用任何含甲醇的固定劑,因為甲醇會在固定過程中破壞肌動蛋白。 優(yōu)選的固定劑是不含甲醇的甲醛。
2.2用PBS沖洗固定的細胞2-3次。
2.3可選:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定細胞3至5分鐘,以增加滲透性。 用PBS沖洗細胞2-3次。
2.4將100μL/孔(96孔板)鬼筆環(huán)肽綴合物工作溶液加入固定的細胞,并在室溫下染色細胞20至90分鐘。
2.5在加上蓋玻片之前,用PBS輕輕沖洗細胞2至3次以除去過量的鬼筆環(huán)肽綴合物,然后在顯微鏡下進行,密封和成像。
注意事項
1)DMSO有毒,使用時請小心操作。
2)了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
Note: 鬼筆環(huán)肽具有毒性,需小心操作(對人,其半數(shù)致死劑量為2mg/Kg)。
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