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Wheat Germ Agglutinin (WGA), Rhodamine羅丹明標(biāo)記小麥胚凝集素

貨號(hào) R1022-1mg 售價(jià)(元) 895
規(guī)格 1mg CAS號(hào)
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貨號(hào)

名稱

規(guī)格

存儲(chǔ)

R1022-10mg

Wheat Germ Agglutinin (WGA), Rhodamine羅丹明標(biāo)記小麥胚凝集素

10mg

2-8℃

R1022-5mg

Wheat Germ Agglutinin (WGA), Rhodamine羅丹明標(biāo)記小麥胚凝集素

5mg

2-8℃

R1022-1mg

Wheat Germ Agglutinin (WGA), Rhodamine羅丹明標(biāo)記小麥胚凝集素

1mg

2-8℃

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 麥胚凝集素(Wheat Germ Agglutinin,WGA)是廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)的凝集素之一。WGA識(shí)別的糖類受體是N-乙酰葡糖胺(GlcNAc),傾向與N-乙酰葡糖胺的二聚體和三聚體結(jié)合。WGA能結(jié)合含N-乙酰葡糖胺末端或殼二糖的寡糖,這類結(jié)構(gòu)在許多血清和膜來(lái)源糖蛋白中普遍存在。細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖、甲殼素(幾丁質(zhì))、軟骨糖胺聚糖和糖脂也能結(jié)合WGA。天然WGA還能通過(guò)N-乙酰神經(jīng)氨酸(唾液酸)殘基與一些糖蛋白相互作用。WGA適用于胰島素受體的純化、血清蛋白和神經(jīng)示蹤。

麥胚凝集素(Wheat Germ Agglutinin,WGA)通常用來(lái)標(biāo)記糖蛋白,用于活細(xì)胞或固定細(xì)胞的質(zhì)膜成像,用于組織切片染色或其它標(biāo)準(zhǔn)的免疫分析實(shí)驗(yàn)。WGA能用作一種革蘭氏染色劑,熒光標(biāo)記革蘭氏陽(yáng)性菌(非革蘭氏陰性菌)。還能用于結(jié)合出芽酵母(比如釀酒酵母)的出芽痕。

本品是羅丹明標(biāo)記的麥胚凝集素(Rhodamine labeled Wheat Germ Agglutinin, Rhodamine-WGA),Ex/Em= 550/575nm,親和純化所得,基本不含未標(biāo)記的熒光素。建議工作濃度范圍是5-20μg/ml。

產(chǎn)品性質(zhì)

 英文同義名:Wheat Germ Agglutinin, Rhodamine Conjugate; Rhodamine labeled Wheat Germ Agglutinin; Wheat germ agglutinin lectin, Rhodamine Conjugate; Rhodamine labeled WGA Lectin;

中文同義名:麥胚凝集素,羅丹明標(biāo)記;羅丹明標(biāo)記的麥胚凝集素;羅丹明標(biāo)記的小麥胚芽凝集素;

糖類特異性:N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)

外觀:溶液(溶于10 mM HEPES, 0.15 M NaCl, pH 7.5, containing 0.1 mM Ca2+, 0.08% sodium azide, 25mM N-acetylglucosamine)

蛋白濃度:5mg/ml

Ex/Em:495/515nm

抑制和/或洗脫糖類:400mM N-乙酰葡糖胺

應(yīng)用:IF、糖生物學(xué)

保存:2-8℃避光保存,至少1年有效。

運(yùn)輸:冰袋運(yùn)輸。

質(zhì)膜標(biāo)記操作流程:

一、標(biāo)記活的真核細(xì)胞

以下是對(duì)貼壁培養(yǎng)在蓋玻片上的活細(xì)胞的通用染色步驟。以下步驟使用HBSS溶液對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行優(yōu)化染色。根據(jù)不同的模型系統(tǒng)和預(yù)期效果來(lái)優(yōu)化染色時(shí)間和濃度。

1.1 制備染色工作液:用HBSS(無(wú)酚紅)稀釋羅丹明-WGA(5mg/ml)到工作濃度,常用工作濃度范圍為5-20μg/ml。使用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋W(xué)GA偶聯(lián)物用于標(biāo)記可能導(dǎo)致增高的非細(xì)胞染色背景。

1.2 細(xì)胞標(biāo)記:加入足量的染色工作液完全覆蓋蓋玻片上的細(xì)胞。37℃孵育10min。

1.3 細(xì)胞清洗:標(biāo)記結(jié)束后,吸走染色工作液,用合適的緩沖液清洗細(xì)胞2次。除非細(xì)胞要做固定,此時(shí)即可在預(yù)熱的HBSS或其它適合于成像的緩沖液中封片。

 

1.4 【可選】細(xì)胞固定:可能用4%多聚甲醛固定染色好的細(xì)胞,37℃ 15min,之后用緩沖液清洗,以及做另一種復(fù)染。如有必要用0.2% Triton X-100透化細(xì)胞。

 

二、標(biāo)記固定的真核細(xì)胞

以下是對(duì)貼壁培養(yǎng)、甲醛固定且未做透化處理細(xì)胞的通用染色步驟。根據(jù)不同的模型系統(tǒng)和預(yù)期效果來(lái)優(yōu)化染色時(shí)間和濃度。

2.1細(xì)胞固定

2.2 細(xì)胞清洗:

2.3 準(zhǔn)備染色工作液

2.4 細(xì)胞標(biāo)記

2.5 細(xì)胞清洗

2.6 細(xì)胞成像

注意事項(xiàng)

本品置于2-8℃長(zhǎng)期保存可能會(huì)產(chǎn)生沉淀,使用前請(qǐng)37℃溫育數(shù)分鐘,之后離心吸取上清使用。此操作基本不會(huì)對(duì)產(chǎn)生性能造成負(fù)影響。

為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。