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羥自由基清除能力測定試劑盒(分光光度法50T/48S)

貨號 SH0053 售價(元) 420
規(guī)格 50T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
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貨號

名稱

規(guī)格

SH0053

羥自由基清除能力測定試劑盒(分光光度法50T/48S)

50管/48樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子,造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損,進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。

測定原理:

H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化為Fe3+ ,導(dǎo)致536nm吸光度下降,樣品對536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了樣品清除羥自由基的能力。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0053-50T/48S

Storage

提取液

50ml

4℃

試劑一:液體

16ml

4℃避光

試劑二:液體

8ml

4℃避光

試劑液體

16ml

4℃

試劑液體

9ml

4℃

說明書

一份

 

自備儀器和用品:

恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿和蒸餾水。

樣品的制備:

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2. 血清、果汁等液體樣品可直接測定。

3. 提取物(或者藥物)可配制成一定濃度,如5 mg/ml。

 

 

測定操作表

1、分光光度計預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至536nm,蒸餾水調(diào)零。

2、工作液配制:使用之前按照每管試劑一:試劑二:試劑三=300:150:300μl)的比例配制,用多少配多少,混勻。

3、在EP管中加入如下試劑

 

空白管

對照管

測定管

工作液μl

750

750

750

混勻,防止局部顏色過濃

樣品μl

 

 

150

試劑四μl

 

150

150

H2Oμl

300

150

 

混勻、37℃保溫60min,8000g 25℃離心5min吸取1ml1ml玻璃比色皿中測定536nm吸光值,空白管、對照管和測定管的吸光值分別記為A空、A對和A測。

注意:空白管和對照管只需測定一次。

計算公式

羥自由基清除率 D% =A-A對)÷A-A對)×100%

A空、A對、A測:空白管、對照管和測定管的吸光值。

注意事項(xiàng)

為了比較不同樣品羥自由基清除能力,對于同一批樣品必須加入等量的樣品,血清、組織勻漿、果汁等液體樣品加入同樣體積,提取物(或者藥物)配制成同樣濃度。