正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義：

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產(chǎn)生的一種自由基，可攻擊生物大分子，如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等，使其交鏈或者斷裂，引起細胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞，與機體衰老和病變有很密切的關(guān)系，清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。

測定原理：

AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子，與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO₂－，NO₂－與對氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物，在530nm處有特征吸收峰，樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關(guān)。

組成：

自備儀器和用品：

天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

樣品處理：

組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1ml提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測。

細胞：按照細胞數(shù)量（10⁴個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測。

培養(yǎng)液或其它液體：直接檢測。

粉劑藥物可配制成相同濃度，比如1mg/ml

測定操作表：

注意：對照管只需測定一次。

計算公式:

超氧陰離子清除率 I%=

注意事項：

1. 試劑一4℃可保存2個月，配制好的試劑二4℃可保存一周，建議實驗前配制，并盡快使用。

2. 樣品處理完后立即進行測定，或者低溫保存不超過24小時。