產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品描述：

     雙丙氨膦（Bialaphos，也稱為Bilanafos）是由幾種土壤鏈霉菌代謝產(chǎn)生的一種天然有機磷三肽抗生素，結(jié)構(gòu)上由兩個L-丙氨酸殘基和一個谷氨酸類似物草丁膦（phosphinothricin，PPT；也稱為glufosinate）組成。一旦進入正常細胞（不含抗性基因），其內(nèi)的肽酶水解雙丙氨膦，釋放草丁膦化合物，從而抑制正常氮代謝和導致胞內(nèi)氨累積，破壞谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase，GS）相關(guān)的各種代謝活動，zui終殺死細胞。雙丙氨膦不僅是一種廣譜除草劑，還能強效抑制革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、和一些真菌類植物 病原菌生長。

產(chǎn)品應用：
    植物基因工程研究（篩選標志）作用機理：雙丙氨膦可用在許多植物物種（包括小麥，大麥，黑麥，燕麥，水稻和玉米）的轉(zhuǎn)化實驗，用來篩選含bar基因（from Streptomyces hygroscopicus）或pat基因（from Streptomyces viridochromeogenes）的轉(zhuǎn)基因工程細胞系，這兩種基因都能編碼草丁膦N-乙酰轉(zhuǎn)移酶（phosphinothricin N-acetyltransferase），使其轉(zhuǎn)化成為一種無GS抑制活性的化合物，從而使得細胞對雙丙氨膦和草丁膦產(chǎn)生抗性。轉(zhuǎn)基因玉米研究，雙丙氨膦比草銨膦的活性更強；轉(zhuǎn)基因小麥研究，雙丙氨膦是zui可靠的選擇標準；酵母基因工程中，雙丙氨膦逐漸成為重要的選擇標準。

產(chǎn)品性質(zhì)

應用案例【轉(zhuǎn)基因的小麥幼胚/愈傷組織篩選】（僅作參考）：

1）使用草銨膦（PPT）或雙丙氨膦進行轉(zhuǎn)化細胞的篩選；

2）粒子轟擊（bombardment）后將未成熟幼胚逐個轉(zhuǎn)移到E3培養(yǎng)基，維持培養(yǎng)7-14天；

3）胚胎轉(zhuǎn)移到含5μg/ml PPT（或雙丙氨膦）的MSCB5培養(yǎng)基（*輪篩選用培養(yǎng)基），黑暗培養(yǎng)2周；于這2周內(nèi)不能正常生長的愈傷組織直接扔棄。

4）用解剖刀將在MSCB5培養(yǎng)基上增殖的細胞簇解離，亞克隆，轉(zhuǎn)移到含有10 μg/ml PPT（或雙丙氨膦）的MSCB10培養(yǎng)基，維持培養(yǎng)4周。

5）在含5μg/ml或10μg/ml PPT（或雙丙氨膦）的培養(yǎng)基上篩選過程的持續(xù)周期約為50-75天。將所有培養(yǎng)物放到植物生長培養(yǎng)箱內(nèi)，設置25 °C，黑暗培養(yǎng)。每一個轉(zhuǎn)基因愈傷組織在含有篩選標志的培養(yǎng)基上zui終生長為大量的胚性愈傷組織。

6）設置1-10μg/ml PPT（或雙丙氨膦）的梯度濃度來測試未轉(zhuǎn)化愈傷組織，以建立更加有效的篩選系統(tǒng)。每一次實驗大概準備20個目標培養(yǎng)平板。2個為對照，1個在N6C1上生長以監(jiān)測培養(yǎng)物的健康情況，另1個在含5-10μg/ml雙丙氨膦的N6C1上生長以驗證未轉(zhuǎn)化細胞對選擇標志的反應。

【注意】：轉(zhuǎn)基因小麥愈傷組織的選擇實驗中雙丙氨膦是有效的篩選標志，然而雙丙氨膦不能殺死未轉(zhuǎn)化細胞。為了得到理想的篩選效果，建議低密度（大概每個平板上10個未成熟幼胚）亞培養(yǎng)粒子轟擊后的細胞。

運輸和保存方法

-20℃長期保存，冰袋運輸。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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