測定意義：

蔗糖是源（葉片等）光合產(chǎn)物向“庫”器官運輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶（Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13）是雙向反應(yīng)酶，既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解，是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一。研究其合成方向SS-Ⅱ的活性對于植物蔗糖合成具有重要意義。

測定原理：

SS-Ⅱ催化游離果糖與葡萄糖供體UDPG反應(yīng)生成蔗糖，蔗糖與間苯二酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化，在480nm下有特征吸收峰，酶活力大小與顏色的深淺成正比。

組成：

自備儀器和用品：

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水

樣品測定的準(zhǔn)備：

按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟：

混勻，25℃準(zhǔn)確水浴10min

沸水浴中煮沸10min左右（蓋緊，以防止水分散失），冷卻

混勻，沸水浴30min，冷卻后， 480nm下測定各管吸光值。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只要做一管。每定管需要設(shè)一個對照管。

SS-Ⅱ活性計算

1、按照蛋白濃度計算

單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。

SS-Ⅱ活性(μg /min/mg prot)= C標(biāo)準(zhǔn)管×V1×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr

2、按照樣本鮮重計算

單位定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。

SS-Ⅱ活性(μg /min /g鮮重) =  C標(biāo)準(zhǔn)管×V1×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W 

C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，1000μg/ml；V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.03ml； V2：加入提取液體積，1ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g；T ：反應(yīng)時間：10min。