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土壤幾丁質(zhì)酶檢測試劑盒（微量法100T/48S）
| 貨號 | SH0370 | 售價（元） | 1560 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0370 |
土壤幾丁質(zhì)酶檢測試劑盒（微量法100T/48S） |
100T/48S |
測定意義：
幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細胞壁中，而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點。
測定原理：
幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖，進一步與對二甲氨基苯甲醛產(chǎn)生紅色化合物，在585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0370-100T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
10ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
4ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
65ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
天平、水浴鍋、離心機、震蕩儀、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板，甲苯、蒸餾水。
樣品處理：
新鮮土樣風(fēng)干，過30-50目篩。
測定操作表：
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對照管 |
測定管 |
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土樣（g） |
0.1 |
0.1 |
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甲苯（μl） |
15 |
15 |
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混勻，25℃靜置15min |
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蒸餾水（μl） |
100 |
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試劑一（μl） |
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100 |
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混勻，37℃培養(yǎng)24h |
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蒸餾水（μl） |
200 |
200 |
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4000rpm，4℃，離心10min，取上清200μl于新的EP管中 |
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試劑二（μl） |
20 |
20 |
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混勻，沸水浴5min |
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試劑三（μl） |
600 |
600 |
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混勻，37℃顯色20min，取200μl于微量石英比色皿/96孔板中，蒸餾水調(diào)零，測定585nm處吸光值，記為A對照管和A測定管，ΔA=A測定管-A對照管。 |
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計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準曲線：y=5.2714x-0.0007，R2=0.9989；x為標(biāo)準品濃度（mg/ml），y為吸光值ΔA。
酶活性定義：37℃條件下，每克土壤每天分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活性單位。
土壤幾丁質(zhì)酶活性（μg/d/g 土樣）=（ΔA +0.0007）÷5.2714×V反總÷W÷T×1000
= 598×（ΔA +0.0007）
V反總：反應(yīng)體系總體積，0.315ml；W：樣本質(zhì)量，0.1g；T：反應(yīng)時間，1d；1000：1mg/ml=1000μg/ml
b. 用96孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準曲線：y=2.6357x-0.0007，R2=0.9989；x為標(biāo)準品濃度（μg/ml），y為吸光值ΔA。
酶活性定義：37℃條件下，每克土壤每天分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活性單位。
土壤幾丁質(zhì)酶活性（μg/d/g 土樣）=（ΔA +0.0007）÷2.6357×V反總÷W÷T×1000
= 1195×（ΔA +0.0007）
V反總：反應(yīng)體系總體積，0.315ml；W：樣本質(zhì)量，0.1g；T：反應(yīng)時間，1d；1000：1mg/ml=1000μg/ml
注意事項:
試劑一充分混勻后再使用。