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土壤羥胺還原酶(HR)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)
貨號 | SH0383 | 售價(元) | 936 |
規(guī)格 | 50T/24S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0383 |
土壤羥胺還原酶(HR)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S) |
50管/24樣 |
測定意義:
土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨,土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體,其強弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失,間接影響氮肥的利用效率。
測定原理:
硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮氣,自身被還原為Fe2+,Fe2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物,在510nm處有吸收峰,羥胺還原酶作用于羥胺,使配合物形成量減少,510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。
試劑組成和配制:
產(chǎn)品名稱 |
SH0383-50T/24S |
Storage |
試劑一:液體 |
10ml |
4℃ |
試劑二:粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
試劑三:液體 |
30ml |
4℃ |
試劑四:液體 |
20ml |
4℃ |
試劑五:液體 |
10ml |
4℃ |
試劑六:液體 |
5ml |
4℃避光 |
試劑七:液體 |
5ml |
4℃避光 |
說明書 |
一份 |
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加10ml蒸餾水充分溶解。
自備儀器和用品:
天平、常溫離心機、可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿、震蕩儀、氮吹儀。
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干,過 30~50 目篩。
測定操作表:
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空白管 |
對照管 |
測定管 |
風(fēng)干土樣(g) |
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0.1 |
0.1 |
試劑一(μl) |
200 |
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200 |
蒸餾水(μl) |
|
200 |
|
試劑二(μl) |
200 |
200 |
200 |
混勻后,用N2氣流排除管中空氣,立即密封,于30℃反應(yīng)1h |
|||
試劑四(μl) |
400 |
400 |
400 |
充分震蕩10min,8000rpm,25℃,離心10min |
|||
上清液(μl) |
100 |
100 |
100 |
試劑五(μl) |
200 |
200 |
200 |
試劑六(μl) |
100 |
100 |
100 |
試劑七(μl) |
100 |
100 |
100 |
蒸餾水(μl) |
500 |
500 |
500 |
充分混勻,25℃靜置顯色10min,用蒸餾水調(diào)零,于1ml玻璃比色皿中測定510nm各管吸光值,分別記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A對照管、A測定管,△A=A空白管-(A測定管-A對照管)。 |
計算公式:
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.185x -0.1828,R2 = 0.9992
酶活定義:每克土壤每天轉(zhuǎn)化1μg羥胺為一個酶活力單位。
HR活性(μg/d /g土樣)=(△A+ 0.1828)÷ 0.185×V反總÷W÷T= 181.62×(△A+0.1828)÷W
V反總:加入提取液體積,1.4ml;W:樣本質(zhì)量,g;T:1/24h
注意事項:
1. 土壤表層溶解氧濃度較大,取樣應(yīng)取表層5cm以下的土壤,否則酶活性較低或者測定不到。
2. 試劑三盡量不要敞口放置,取完立即加蓋擰緊。
3. 反應(yīng)體系最好能用氮吹儀排除溶解氧,若無此裝置,則加入試劑三后立即密封,于30℃反應(yīng)1h。