歡迎蒞臨南京沃博生物科技有限公司官方網(wǎng)站!

當(dāng)前位置: 首頁 - 產(chǎn)品目錄 - 生化試劑盒

土壤羥胺還原酶(HR)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)

貨號 SH0383 售價(元) 936
規(guī)格 50T/24S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0383

土壤羥胺還原酶(HR)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨,土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體,其強弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失,間接影響氮肥的利用效率。

測定原理:

硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮氣,自身被還原為Fe2+Fe2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物,在510nm處有吸收峰,羥胺還原酶作用于羥胺,使配合物形成量減少,510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0383-50T/24S

Storage

試劑一:液體

10ml

4℃

試劑二:粉劑

1

4℃

試劑三:液體

30ml

4℃

試劑:液體

20ml

4℃

試劑五:液體

10ml

4℃

試劑:液體

5ml

4℃避光

試劑:液體

5ml

4℃避光

說明書

一份

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加10ml蒸餾水充分溶解。

自備儀器和用品:

天平、常溫離心機、可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿、震蕩儀、氮吹儀。

樣品處理:

新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干,過 30~50 目篩。

測定操作表:

 

空白管

對照管

測定管

風(fēng)干土樣(g

 

0.1

0.1

試劑一(μl

200

 

200

蒸餾水(μl

 

200

 

試劑二(μl

200

200

200

混勻后,用N2氣流排除管中空氣,立即密封,于30℃反應(yīng)1h

試劑四(μl

400

400

400

充分震蕩10min,8000rpm,25℃,離心10min

上清液(μl

100

100

100

試劑五(μl

200

200

200

試劑六(μl

100

100                                                                                                                                                                              

100

試劑七(μl

100

100

100

蒸餾水(μl

500

500

500

充分混勻,25℃靜置顯色10min,用蒸餾水調(diào)零,于1ml玻璃比色皿中測定510nm各管吸光值,分別記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A對照管、A測定管,△AA空白管-(A測定管-A對照管)。

計算公式

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.185x -0.1828,R2 = 0.9992

酶活定義:每克土壤每天轉(zhuǎn)化1μg羥胺為一個酶活力單位。

HR活性(μg/d /g土樣)=△A+ 0.1828÷ 0.185×V反總÷W÷T= 181.62×△A+0.1828÷W

V反總:加入提取液體積,1.4ml;W:樣本質(zhì)量,g;T1/24h

注意事項:

1. 土壤表層溶解氧濃度較大,取樣應(yīng)取表層5cm以下的土壤,否則酶活性較低或者測定不到。

2. 試劑三盡量不要敞口放置,取完立即加蓋擰緊。

3. 反應(yīng)體系最好能用氮吹儀排除溶解氧,若無此裝置,則加入試劑三后立即密封,于30℃反應(yīng)1h。