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土壤堿性木聚糖酶(S-BAX)測(cè)定試劑盒(分光光度法50T/24S)
貨號(hào) | SH0397 | 售價(jià)(元) | 540 |
規(guī)格 | 50T/24S | CAS號(hào) |
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0397 |
土壤堿性木聚糖酶(S-BAX)測(cè)定試劑盒(分光光度法50T/24S) |
50管/24樣 |
測(cè)定意義:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖,降低釀造中物料的粘度,促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中,BAX一般分離自最適生長(zhǎng)pH為9 -11的微生物。
測(cè)定原理:
BAX在堿性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計(jì)算BAX活力。
組成:
產(chǎn)品名稱 |
SH0397-50T/24S |
Storage |
緩沖液:液體 |
20ml |
4℃ |
試劑一:液體 |
5ml |
4℃避光 |
試劑二:液體 |
25ml |
4℃避光 |
說(shuō)明書(shū) |
一份 |
自備儀器和用品:
天平、常溫離心機(jī)、震蕩儀、恒溫水浴鍋,可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 ml玻璃比色皿。
樣品處理:
新鮮土樣風(fēng)干,過(guò)30-50目篩。
測(cè)定操作表:
|
對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
土樣(g) |
0.1 |
0.1 |
緩沖液(μl) |
600 |
400 |
試劑一(μl) |
|
200 |
混勻,50℃震蕩反應(yīng)30min,立即90℃水浴10min,8000g,25℃離心10min,取上清500μl |
||
試劑二(μl) |
500 |
500 |
混勻,90℃水浴中顯色5min,1ml玻璃比色皿,對(duì)照管調(diào)零,測(cè)定A540。 |
S-BAX計(jì)算公式:
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 2.8432x - 0.0293,R2 = 0.9985
酶活定義:50℃,pH9.0條件下,每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生1μmol 還原糖所需的酶量為一個(gè)酶活單位。
S-BAX活力(μmol/d/g 土樣)=(A540+0.0293)÷ 2.8432×V反總×103÷ W÷T÷ 150
= 67.53×(A540+0.0293)÷ W
V反總:反應(yīng)總體積,0.6ml;T:反應(yīng)時(shí)間,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。
注意事項(xiàng):
1. 保證震蕩反應(yīng)30min,使酶與底物充分接觸。
2. 注意90℃水浴防止爆開(kāi),以免改變反應(yīng)體系。
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