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土壤中性木聚糖酶（S-NEX）測(cè)定試劑盒(微量法100T/48S)
| 貨號(hào) | SH0402 | 售價(jià)（元） | 936 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0402 |
土壤中性木聚糖酶（S-NEX）測(cè)定試劑盒(微量法100T/48S) |
100T/48S |
測(cè)定意義：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中，NEX一般分離自最適生長(zhǎng)pH為6-8的微生物。
測(cè)定原理：
NEX在中性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng)，在540nm處有特征吸收峰，反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，通過測(cè)定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率，可計(jì)算NEX活力。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0402-100T/48S |
Storage |
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緩沖液：液體 |
10ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
3ml |
4℃避光 |
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試劑二：液體 |
10ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
天平、常溫離心機(jī)、震蕩儀、恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。
樣品處理：
新鮮土樣風(fēng)干，過30-50目篩。
測(cè)定操作表：
1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm。
2、 操作表
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對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
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土樣（g） |
0.02 |
0.02 |
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緩沖液（μl） |
150 |
100 |
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試劑一（μl） |
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50 |
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混勻，50℃震蕩反應(yīng)30min，立即90℃水浴10min，8000g，25℃離心10min，取上清100μl |
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試劑二（μl） |
100 |
100 |
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混勻，90℃水浴中顯色5min，取180μl于微量石英比色皿/96孔板測(cè)定540nm處吸光值A，分別記為A對(duì)照管、A測(cè)定管，△A=A測(cè)定管-A對(duì)照管。 |
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S-NEX計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 1.6904x + 0.0058，R2 = 0.9989
酶活定義：50℃，pH6.0條件下，每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生1μmol 還原糖所需的酶量為一個(gè)酶活單位。
S-NEX活力（μmol/d/g土樣）=（△A-0.0058）÷ 1.6904×V反總×103÷ W÷T÷ 150
= 28.4×（△A -0.0058）÷ W
V反總：反應(yīng)總體積，0.15ml；T：反應(yīng)時(shí)間，1/48d；1000：1mmol/L =103μmol/L；150：木糖分子量。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.8452x + 0.0058，R2 = 0.9989
酶活定義：50℃，pH6.0條件下，每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生1μmol 還原糖所需的酶量為一個(gè)酶活單位。
S-NEX活力（μmol/d/g土樣）=（△A-0.0058）÷ 0.8452×V反總×103÷ W÷T÷ 150
= 56.8×（A540-0.0058）÷ W
V反總：反應(yīng)總體積，0.15ml；T：反應(yīng)時(shí)間，1/48d；1000：1mmol/L =103μmol/L；150：木糖分子量。
注意事項(xiàng)：
1. 保證震蕩反應(yīng)30min，使酶與底物充分接觸。
2. 注意90℃水浴防止爆開，以免改變反應(yīng)體系。