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土壤植酸酶(phytase)檢測(cè)試劑盒(微量法100T/48S)

貨號(hào) SH0404 售價(jià)(元) 1200
規(guī)格 100T/48S CAS號(hào)
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貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

SH0404

土壤植酸酶(phytase)檢測(cè)試劑盒(微量法100T/48S)

100T/48S

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類(lèi)水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類(lèi)酶的總稱(chēng),屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。

測(cè)定原理:

植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無(wú)機(jī)磷與肌醇衍生物,無(wú)機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性。

組成:

產(chǎn)品名稱(chēng)

SH0404-100T/48S

Storage

緩沖液:液體

60ml

4℃

試劑一:粉劑

1

4℃避光

試劑二:液體

15ml

4℃

顯色劑:粉劑

6

4℃避光

說(shuō)明書(shū)

一份

 

試劑一:粉劑×1瓶,4℃避光保存,臨用前加緩沖液30ml配制,現(xiàn)用現(xiàn)配;用不完的試劑4℃保存一個(gè)月。

顯色劑:粉劑×6管,4℃避光保存,臨用前根據(jù)用量每瓶加0.4ml雙蒸水溶解,再加1.6ml試劑二混勻

自備儀器和用品:

天平、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、恒溫水浴鍋,甲苯(不允許快遞)

樣本處理:

新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過(guò)30~50目篩。

測(cè)定操作表:

 

對(duì)照管

測(cè)定管

樣本g

0.03

0.03

甲苯

20

20

振蕩混勻,室溫放置15min

緩沖液μl

500

 

試劑一μl

 

500

混勻,37℃孵育24h,10000g,4℃離心5min,取上清

上清

100

100

顯色劑μl

100

100

混勻,靜置15min,測(cè)定700nm處吸光值,A=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

酶活性計(jì)算公式:

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.8795x + 0.0084,R2 = 0.9977;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/ml),y為吸光值△A。

酶活性定義:37℃,pH5.5的條件下,每克土樣每小時(shí)從5mmol/L的植酸鈉溶液中釋放出1μmol的無(wú)機(jī)磷為一個(gè)酶活力單位。

植酸酶活性(μmol/h /g 土樣)=△A-0.0084÷0.8795×V反總÷W÷T

                             =0.82×△A-0.0084

V反總:反應(yīng)總體積,0.52mlT:反應(yīng)時(shí)間,24h;W:樣本質(zhì)量,0.03g。

注意事項(xiàng):

1、顯色劑需要臨用前根據(jù)用量配制,每一瓶是10個(gè)樣本的用量,新配制的顯色劑若有顏色則已經(jīng)污染或者試劑過(guò)期,應(yīng)放棄使用。

2、ΔA線性范圍為0.01-0.5。