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土壤β-木糖苷酶（S-β-XYS）檢測(cè)試劑盒(微量法100T/48S)
| 貨號(hào) | SH0406 | 售價(jià)（元） | 2160 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0406 |
土壤β-木糖苷酶（S-β-XYS）檢測(cè)試劑盒(微量法100T/48S) |
100T/48S |
測(cè)定意義：
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細(xì)菌和真菌等生物體，是催化木聚糖類半纖維素降解的關(guān)鍵酶，產(chǎn)物木糖可作為碳源應(yīng)用于微生物發(fā)酵。另外，β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應(yīng)用于造紙工業(yè)，比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。
測(cè)定原理：
S-β-XYS催化對(duì)硝基苯酚-β-D-木糖苷產(chǎn)生對(duì)硝基苯酚，對(duì)硝基苯酚在405nm處有特征吸收峰，測(cè)定405nm光吸收增加速率，可計(jì)算S-β-XYS活性。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0406-100T/48S |
Storage |
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提取液：液體 |
100ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
1ml |
4℃避光 |
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試劑二：液體 |
10ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
10ml |
4℃ |
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說(shuō)明書(shū) |
一份 |
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自備儀器和用品：
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
粗酶液提取：
約0.1g鮮土或風(fēng)干土樣，加入1ml提取液進(jìn)行冰浴勻漿，室溫振蕩提取30min，然后10000g，4℃，離心10min，取上清待測(cè)。
測(cè)定操作表：
1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至405nm。
2、 操作表
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對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
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樣本（μl） |
40 |
40 |
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試劑一（μl） |
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10 |
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試劑二（μl） |
80 |
70 |
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混勻，45℃水浴20min |
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試劑三（μl） |
80 |
80 |
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混勻，靜置5min，405nm處測(cè)定吸光值A，計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。 |
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β-木糖苷酶活性計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=13.226x+0.0011，R2=0.9998；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/ml），y為吸光值ΔA。
酶活定義：每克土樣每天催化產(chǎn)生1μmol對(duì)硝基苯酚的酶量為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（μmol/d /g 土樣）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V樣總：加入提取液體積，1ml； V反總：反應(yīng)總體積，0.12ml；V樣：反應(yīng)中樣品體積，0.04ml； W：樣品質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，20min=1/72d；
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=6.613x+0.0011，R2=0.9998；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/ml），y為吸光值ΔA
酶活定義：每克土樣每天催化產(chǎn)生1μmol對(duì)硝基苯酚的酶量為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（μmol/d /g 土樣）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=32.66×(ΔA-0.0011)÷W
V樣總：加入提取液體積，1ml； V反總：反應(yīng)總體積，0.12ml；V樣：反應(yīng)中樣品體積，0.04ml； W：樣品質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，20min=1/72d；
ΔA控制在0.01-1范圍內(nèi)，若ΔA大于1，可適當(dāng)減小樣本量。
標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為：0.01μmol/ml-0.5μmol/ml。