測定意義：

木質(zhì)素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇構(gòu)成的一類物質(zhì)，存在于木質(zhì)組織中，主要作用是通過形成交織網(wǎng)來硬化細(xì)胞壁。木質(zhì)素主要位于纖維素纖維之間，起抗壓作用。

測定原理：

木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙?；笤?/span>280nm處有特征吸收峰，280nm的吸光值高低與木質(zhì)素含量正相關(guān)。

試劑組成和配制：

自備儀器和用品：

天平、40目篩，玻璃試管、燒杯、離心機，恒溫水浴鍋、封口膜、烘箱、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、高氯酸，濃硫酸。

樣品處理：

樣品80℃烘干至恒重，粉碎，過40目篩，稱取約2mg（記為W）于10ml玻璃試管中（務(wù)必用玻璃試管，不可用Ep管）。

測定步驟：

于10ml玻璃試管中，用封口膜密封，充分混勻，80℃水浴40min，每隔10min震蕩一次，然后自然冷卻

充分混勻

取200μl于微量石英比色皿/96孔板，測定280nm處吸光值A。分別記為A空白管和A測定管，ΔA=A測定管-A空白管

計算公式：

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0347x+0.0068，R²=0.9889

Lignin（mg/g干重）= (ΔA-0.0068)÷0.0347×V反總×10^-3÷W×T=0.0294×(ΔA-0.0068) ÷0.002×50

V反總：反應(yīng)總體積：1.02ml；W：樣本質(zhì)量，g；T：稀釋倍數(shù)

注意事項：

1、試劑一有毒性，請操作時做好防護(hù)措施，加熱前必須用封口膜密封，以防氣體溢出。

2、加熱過程中有劇烈反應(yīng)，震蕩時輕搖，以免壓力過大噴出造成人身傷害。

3、試劑三具有強刺激性，建議操作過程全部在通風(fēng)櫥子操作。

4、取上清加試劑三步驟根據(jù)自己樣品乙?；潭?，試劑三的用量可調(diào)整，保證吸光值在0.1-0.8之間即可，并在公式中參與計算。