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磷脂酶D（ PLD ）檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)

貨號	SH0474	售價（元）	4080
規(guī)格	50T/48S	CAS號

產品簡介
相關產品

貨號	名稱	規(guī)格
SH0474	磷脂酶D（ PLD ）檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)	50管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

磷脂酶D（EC3.1.4.4）即磷脂酰膽堿水解酶，是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應的一類酶的總稱，廣泛存在于高等動植物和細菌等多種生物體中，具有參與細胞脂質代謝、信號傳導、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。

測定原理：

磷脂酶D催化水解磷脂酰膽堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和膽堿，膽堿在膽堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過氧化氫，過氧化氫在過氧化氫酶的作用下將4-氨基安替比林和重蒸酚氧化成粉紅色物質，在500nm處有特征吸收峰。

組成：

產品名稱	SH0474-50T/48S	Storage
提取液：液體	50ml	4℃
試劑一：液體	55ml	4℃避光
試劑二：液體	8ml	4℃避光
試劑三：粉劑	1瓶	-20℃避光
試劑四：液體	35ml	4℃避光
標準品：液體	1ml	4℃避光
說明書	一份

試劑三：粉劑×1瓶，-20℃避光保存。臨用前加3ml無水乙醇充分溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

自備儀器和用品：

天平、研缽、超速冷凍離心機、可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿、恒溫水浴鍋，無水乙醇。

酶液提取

1. 組織：按照質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1ml提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心5min，取全部上清于4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于1ml試劑一。

2. 細胞：按照細胞數量（10⁴個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后于4℃，10000g離心5min，取全部上清于4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于1ml試劑一。

3. 血清：直接測定。

測定操作

	空白管	標準管	測定管
試劑一（μl）	100
試劑二（μl）	150	150	150
標準品（μl）		100
樣品（μl）			100
試劑三（μl）	50	50	50
充分混勻，30℃反應30min，沸水浴10min，打開蓋子，自然冷卻5min。
試劑四（μl）	700	700	700
30℃反應30min，于1ml玻璃比色皿，空白管調零，測定500nm處吸光值，分別記為A標準管和A測定管。