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血清總鐵結(jié)合能力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(微量法100T/96S)

貨號(hào) SH0564 售價(jià)(元) 552
規(guī)格 100T/96S CAS號(hào)
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貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0564

血清總鐵結(jié)合能力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(微量法100T/96S)

100T/96S

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

血清總鐵結(jié)合能力指血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可結(jié)合鐵的能力,其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。

測(cè)定原理:

Fe2+與菲洛嗪反應(yīng)形成紫紅色化合物,在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下,血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可以與Fe3+結(jié)合,剩余未結(jié)合的Fe3+可以被還原成Fe2+,此時(shí)吸光度A1與未結(jié)合Fe3+數(shù)量正相關(guān);酸化后,轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的Fe3+釋放,并且進(jìn)一步被還原成Fe2+ ,此時(shí)吸光度A2與總Fe3+數(shù)量正相關(guān)。A2A1TIBC濃度呈正比。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0564-100T/96S

Storage

試劑一:液體

30ml

4℃

試劑二:液體

5ml

4℃避光

試劑三:液體

5ml

4℃避光

試劑四:液體

7ml

4℃

說明書

一份

 

試劑三:液體5ml×1瓶,4℃避光保存。(臨用前根據(jù)用量將A液和B液按1:1混合)

自備儀器和用品:

天平、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

測(cè)定操作表:

1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至562nm。

2、操作表

 

對(duì)照管

測(cè)定管

血清(μl

 

40

試劑一(μl

320

280

試劑二(μl

40

40

混勻,37℃10min

試劑三(μl

40

40

混勻,37℃,5min,對(duì)照管調(diào)零,取200μl于微量石英比色皿/96孔板測(cè)定562nm處吸光值A1,測(cè)完后立即加入試劑四

試劑四(μl

60

60

混勻,37℃,5min,對(duì)照管調(diào)零,取200μl于微量石英比色皿/96孔板測(cè)定562nm處吸光值A2。ΔA=A2-A1。

血清總鐵結(jié)合力計(jì)算公式:

總鐵結(jié)合能力定義37℃條件下,每升血清結(jié)合Fe3+μmol 數(shù)。

a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.5478x+0.0281,R2=0.9981

總鐵結(jié)合能力TIBCμmol/L=ΔA-0.0281÷0.5478×V反總÷V= 20.99×ΔA-0.0281

b. 96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.2739x+0.0281R2=0.9981

總鐵結(jié)合能力TIBCμmol/L=ΔA-0.0281÷0.2739×V反總÷V= 41.98×ΔA-0.0281

V反總:反應(yīng)總體積,0.46mlV樣:反應(yīng)中樣本體積,0.04ml

注意事項(xiàng):

1. 吸光值大于0.8,樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定,注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù)。

2. 試劑二、試劑三有一定的毒性,操作時(shí)請(qǐng)做好防護(hù)措施。

3. 檢測(cè)限為4.78μmol/L