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一氧化氮（Nitric oxide，NO）含量檢測(cè)試劑盒 (分光光度法50T/48S)
| 貨號(hào) | SH0621 | 售價(jià)（元） | 408 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱(chēng) |
規(guī)格 |
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SH0621 |
一氧化氮（Nitric oxide，NO）含量檢測(cè)試劑盒 (分光光度法50T/48S) |
50T/48S |
測(cè)定意義：
NO（Nitric Oxide，NO）廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中，特別是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細(xì)胞間及細(xì)胞內(nèi)的信息物質(zhì)，發(fā)揮信號(hào)傳遞的作用，是一種新型的生物信使分子，在機(jī)體的生理、病理過(guò)程中起著重要的作用。
測(cè)定原理：
NO在體內(nèi)或水溶液中極易氧化生成NO2—，在酸性條件下，NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物，進(jìn)一步與萘基乙烯基二胺偶合，產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰，測(cè)定其吸光值，可以計(jì)算NO含量。
組成：
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產(chǎn)品名稱(chēng) |
SH0621-50T/48S |
Storage |
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提取液：液體 |
50ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
15ml |
4℃避光 |
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試劑二：粉劑 |
15ml |
4℃避光 |
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說(shuō)明書(shū) |
一份 |
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試劑二：液體15ml×1瓶，4℃避光保存。（用之前60℃加熱震蕩15min）
自備儀器和用品：
天平、研缽或勻漿器、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1ml玻璃比色皿、蒸餾水。
樣品處理：
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1ml提取液）進(jìn)行冰浴勻漿。10000g，4℃離心15min，取上清，置冰上待測(cè)。
2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后10000g，4℃，離心15min，取上清置于冰上待測(cè)。
3. 體液和培養(yǎng)液等其它液態(tài)樣品：直接測(cè)定。
測(cè)定步驟和操作表：
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空白管 |
測(cè)定管 |
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樣品（μl） |
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400 |
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提取液（μl） |
400 |
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試劑一（μl） |
250 |
250 |
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試劑二（μl） |
250 |
250 |
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混勻，室溫靜置15min， 1ml玻璃比色皿，測(cè)定A550，ΔA=A測(cè)定-A空白 |
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NO含量計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：y= 0.016x -0.0103，R2= 0. 9986
1、組織樣品：
（1）按樣本質(zhì)量計(jì)算
NO含量（μmol/g 鮮重）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反總÷（V樣÷V樣總×W）×10-3
= 0.14×（ΔA +0.0103）÷W
（2）按樣本蛋白濃度計(jì)算
NO含量（μmol/mg prot）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反總÷（V樣×Cpr）×10-3
= 0.14×（ΔA +0.0103）÷Cpr
2、細(xì)胞：
NO含量（μmol/104 cell）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反總÷（V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量）×10-3
= 0.14×（ΔA +0.0103）÷細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)）
3、其他樣品：
NO含量（μmol/L）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反總÷V樣
= 140×（ΔA +0.0103）
V反總：反應(yīng)總體積，0.9ml；V樣：反應(yīng)中樣品體積，0.4ml；V樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：蛋白濃度，mg/ml