歡迎蒞臨南京沃博生物科技有限公司官方網(wǎng)站!

淀粉總量檢測試劑盒(微量法100T/96S)

貨號 SH0637 售價(元) 3240
規(guī)格 100T/96S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0637

淀粉總量檢測試劑盒(微量法100T/96S)

100T

簡介

淀粉是人類飲食中主要的能量來源,它在多種食物中富含,如谷類、豆類、根莖類蔬菜和水果。淀粉在許多加工類食品和動物飼料中也占有相當大的比例,并以天然或化學(xué)改性的形式在工業(yè)上得到廣泛應(yīng)用。淀粉測定方法分為酸水解法和酶分析法,其中酸水解只能應(yīng)用干純淀粉樣品。針對不同的樣品,酶分析方法在前處理步驟上有所不同經(jīng)典的AACC76-11法采用淀粉在高壓蒸汽滅菌鍋中及含水的條件下凝膠化,并用淀粉葡糖苷酶將淀粉轉(zhuǎn)化為葡萄糖,再測定葡萄糖含量,采用AACC76-11法會導(dǎo)致許多樣品和材料中包括高直鏈淀粉玉米淀粉和谷物制品淀粉含量檢測結(jié)果偏低。近來,我們檢測方法進行了改進,使耐熱α-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶可以在相同的pH(pH=5.0)下進行孵育,這樣簡化了測定步驟,并將麥芽酮糖生成的可能性降到最低。淀粉總量試劑盒可測定大部分食品、飼料、植物和谷物制品(天然或加工過的),對于大部分樣品如小麥粉中的淀粉在孵育中大約100℃并加入耐熱α-淀粉酶會完全溶解;對于含有大量抗性淀粉的樣品如高直鏈玉米淀粉需用1.7M NaOH或熱DMSO進行預(yù)溶解;而含有可溶性淀粉或麥芽糊精的樣品,不需要用耐熱-淀粉酶處理。

 

產(chǎn)品性能

特異性:可用于測定-葡聚糖(包括淀粉、糖原、植物糖原和非抗性麥芽糊精)

靈敏度:最小吸光度差異為0.010吸光度單位。這相當于當樣品質(zhì)量100mg,總淀粉含量為0.09mg。

檢測限:吸光度差異為0.020吸光度單位。這相當于樣品質(zhì)量為100mg時,總淀粉含量為0.18mg。

檢測范圍:在5-100 μg D-葡萄糖范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。重復(fù)檢測同一樣品溶液其吸光度值會有0.005-0.010吸光度單位的差異,如果樣品經(jīng)過稀釋,計算結(jié)果時需要乘以相應(yīng)的稀釋系數(shù)(F)。

檢測原理

1耐熱a-淀粉酶將淀粉水解為可溶性的、有支鏈的、無支鏈的麥芽糊精

 (2)含大量抗性淀粉的樣品可以加入2 mol/L KOH混合均勻,在4℃下使抗性淀粉預(yù)溶解,然后用醋酸鈉緩沖液中和,最后用α-淀粉酶處理。也可以在100℃下,用DMSO溶解,再加入α-淀粉酶處理生成麥芽糊精。

(3)淀粉葡糖苷酶(AMG)將麥芽糊精定量水解成D-葡萄糖

(4)D-葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化成D-葡萄糖酸鹽,并釋放等摩爾的H2O2。再用過氧化物酶催化H2O2反應(yīng),產(chǎn)生的昆亞胺染料含量用比色法測定。

(5)過氧化氫被過氧化物酶催化生成水和氧氣,同時對羥基苯甲酸和4-氨基安替比林被氧化生成醌亞胺;這一過程可以通過比色反應(yīng)進行測定。

如果樣品中含高水平的D-葡萄糖和麥芽糊精,可在測定前用80%乙醇處理。一個樣品的檢測可以在70分鐘內(nèi)完成。

保存條件

未配制前在規(guī)定存儲條件下6個月內(nèi)有效,配制使用后在規(guī)定存儲條件下3個月內(nèi)有效(各組分詳細儲存條件見瓶身)。

 

試劑盒組成與配置

試劑名稱

儲存條件

SH0637-100T

注意事項

試劑一

-20℃

液體10ml×1

建議到貨后將該試劑分裝為,儲存在EP管中-20℃保存。在使用時,取出所需量的試劑,同時在使用過程應(yīng)盡量保持低溫。

試劑二

-20℃

液體10ml×1

用之前可分為適當大小的等分試樣,儲存在-20℃以下的EP管中。在使用時,取出所需量的試劑,同時在使用過程應(yīng)盡量保持低溫。

試劑三

4℃

粉劑×1

用之前900ml蒸餾水溶解混勻,后用2M氫氧化鉀調(diào)節(jié)至pH7.4,最后用蒸餾水定容至1000ml,即為試劑三。

試劑四

-20℃

粉劑× 1

20ml試劑三溶解試劑四中的粉末,并將其定量轉(zhuǎn)移試劑三的瓶子中。配制后的試劑要嚴格避光保存。(配制后的試劑-20℃可穩(wěn)定保存1~3個月)

備注:如果該試劑要以冷凍狀態(tài)儲存,則最好將其分為小份,在使用過程中僅冷凍/解凍一次。

新制備試劑,其顏色為淺黃色或淺粉色。在2-3個月后,該溶液將呈現(xiàn)出更強烈的粉紅色應(yīng)立即對照蒸餾水讀數(shù),吸光度應(yīng)小于0.05,若大于此數(shù)值,則表示該溶液不可再使用

標準品

4℃

液體×1

D-葡萄糖標準溶液(5 ml,1.0 mg/ml

 

1. 所需的儀器和用品:

2. 可見分光光度計/酶標儀、10mm玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、可調(diào)式移液器、離心機、磁力攪拌器、渦旋儀等

 

2. 需配試劑:

a、 醋酸鈉緩沖液(100 mM,pH 5.0CaCl25 mM):在900 ml蒸餾水中加入5.8 ml冰醋酸,后加入0.74 g二水CaCl2并溶解,使用NaOH溶液將pH值調(diào)節(jié)到5.0,使用蒸餾水定容1L,并在4°C下儲存緩沖液。

b酸鈉緩沖液(200mM,pH 4.5含CaCl25 mM):向900 ml蒸餾水中添加11.6 ml冰醋酸,后加入0.74 g二水CaCl2并溶解,使用氫氧化鈉溶液將pH值調(diào)整為4.5,使用蒸餾水定容1L,并在4°C下儲存緩沖液。

c、 醋酸鈉緩沖液(600 mMpH 3.8含CaCl25 mM):向1600 ml蒸餾水中添加69.6 ml冰醋酸,后加入1.48 g二水合CaCl2并溶解,使用氫氧化鈉溶液pH值調(diào)節(jié)至3.8,使用蒸餾水定容至2L,并在4°C下儲存緩沖液。

d、 NaOH溶液(1.7 M):稱取68g氫氧化鈉,加入900ml去離子水,攪拌溶解將容量調(diào)整為1L并儲存在密封容器中,室溫保存。

e、 MOPS緩沖液(50mM,pH7.0)含CaCl2(5mM)、疊氮化鈉(0.02%):11.55g MOPS(鈉, Sigma cat. M-9381)加入900ml蒸餾水溶解, 后加入二水合CaCl2 0.74g,HCl調(diào)節(jié)pH=7.0, 稱取疊氮化鈉0.2g 完全溶解然后調(diào)整到1L,并在4℃保存。

注:在調(diào)整pH值之前,不得添加疊氮化鈉,疊氮化鈉酸化釋放出有毒氣體。

淀粉含量測定

a) 不含抗性淀粉的樣品總淀粉含量的測定

1. 碾磨谷物、植物或食品,使用0.5mm孔徑的篩網(wǎng)進行分篩;

2. 準確稱取100 mg待測樣品,一式兩份(一份作為空白)放入50ml離心管中

3. 向兩支離心管中分別加入10ml緩沖液a醋酸鈉緩沖液(100mM,pH 5.0含CaCl25mM),使用渦旋移混勻5s;

4. 向其中一個離心管(樣品管)中添加0.1 ml未稀釋的試劑一,向第二根離心管(空白)中加入0.1ml緩沖液a醋酸鈉緩沖液(100mMpH 5.0含CaCl25mM,將管中液體混合均勻;

5. 輕輕旋上蓋子,離心管轉(zhuǎn)移到100℃沸水浴中處理2min后,擰緊瓶蓋;渦旋儀上用力混合離心管內(nèi)容物,5min后,再次將離心管內(nèi)容物渦旋5s;然后將試管放回100℃沸水浴中15min,從沸水浴中取出試管,在渦旋儀上劇烈渦旋5s;最后離心管放在50°C的水浴中平衡管內(nèi)溫度至少5min;

6. 向樣品管中添加0.1 ml未稀釋試劑二,渦旋3s,向空白中添加0.1 ml緩沖液a醋酸鈉緩沖液(100 mM pH 5.0含CaCl25 mM;輕輕混勻后50°C處理樣品30min;

7. 從水浴中取出離心管,室溫冷卻后將管子倒置幾次,使管蓋內(nèi)側(cè)的冷凝水與管內(nèi)的液體混合;

8. 從離心管(樣品和空白中分別取出2.0 ml溶液轉(zhuǎn)移到5ml EP管中,以13000 rpm的轉(zhuǎn)速離心EP5min并靜置5min;吸取1.0 ml上清液轉(zhuǎn)移到新的15ml離心管中,加入4 ml緩沖液a醋酸鈉緩沖液(100 mM,pH 5.0含CaCl25 mM),并將管內(nèi)液體混合均勻;

9. 分別從15ml離心管(樣品和空白中吸取溶液0.05 ml到新的5ml EP管中;接著向管中加入1.5 ml 試劑四,輕輕混勻,50°C下培養(yǎng)20min;反應(yīng)結(jié)束后吸取200ul液體轉(zhuǎn)移至96孔板中,于510nm處讀數(shù);

同時孵化:

標準管0.05 ml葡萄糖標準溶液(1.0 mg/ml)加1.5 ml試劑,一式四份;

空白管0.05 ml 緩沖液a乙酸鈉緩沖液(100 mM,pH 5.0含CaCl25 mM)和1.5 ml試劑,一式兩份。

與樣品管和空白管同時50°C下培養(yǎng)20min;反應(yīng)結(jié)束后吸取200ul液體轉(zhuǎn)移至96孔板中,于510nm處讀數(shù);

10. 計算淀粉含量。

注:對于本提取方案,最終提取體積(EV=10.2   稀釋度(D=1、511

1如果樣品的吸光度值小于0.05,步驟8中離心后吸取上清,無需再添加緩沖液稀釋;如果吸光度值大于0.60吸取離心后上清,可以加入10ml緩沖液a進行稀釋(稀釋度(D=1、511)。

2當分析含有約20-30%淀粉的草和青貯飼料等纖維樣品時,使用攪拌機研磨樣品,研磨約60秒(直到樣品均勻為止)。步驟2中稱取樣品增加至500 mg進行后續(xù)實驗;步驟5100°C沸水浴的處理時間延長至60min;步驟8中需要對樣品稀釋20再進行后續(xù)檢測(稀釋度(D=20)。

b) 含抗性淀粉樣品總淀粉含量的測定

1. 碾磨谷物、植物或食品,使用0.5mm孔徑的篩網(wǎng)進行分篩;

2. 準確稱取100mg待測樣品,一式兩份(一份作為空白)放入50ml離心管中;

3. 向離心管中加入0.2ml 80%乙醇混合均勻,使樣品在離心管中均勻分散,該步驟非常重要;

4. 向離心管中添加2ml 1.7M NaOH溶液,并在渦旋儀渦旋混勻15s;之后離心管放在冰水浴中處理15min,在此期間需要間歇渦旋儀渦旋3-5,確保樣品中沒有結(jié)塊;

5. 向離心管中添加8 ml緩沖液c醋酸鈉緩沖液(600 mM,pH 3.8含CaCl25 mM,渦旋儀上渦旋混勻;

6. 立即樣品管中添加0.1 ml未稀釋的試劑一,然后再添加0.1 ml試劑二。向第二根離心管(空白管)中添加0.2 ml緩沖液a醋酸鈉緩沖液(100 mM,pH 5.0含CaCl25 mM,旋緊兩個離心管蓋渦旋混勻3s并將離心放置在50°C下培養(yǎng)30min;

7. 從水浴中取出離心管,室溫冷卻后將管子倒置幾次,使管蓋內(nèi)側(cè)的冷凝水與管內(nèi)的液體混;

8. 從離心管(樣品和空白中分別取出2.0 ml溶液轉(zhuǎn)移到5ml EP管中,以13000 rpm的轉(zhuǎn)速離心EP5min并靜置5min;吸取1.0 ml上清液轉(zhuǎn)移到新的15ml離心管中,加入4 ml緩沖液a醋酸鈉緩沖液(100 mM,pH 5.0含CaCl25 mM),并將管內(nèi)液體混合均勻

9. 分別從15ml離心管(樣品和空白中吸取溶液0.05 ml到新的5ml EP管中;接著向管中加入1.5ml 試劑四,輕輕混勻,50°C下培養(yǎng)20min;反應(yīng)結(jié)束后吸取200ul液體轉(zhuǎn)移至96孔板中,于510nm處讀數(shù);

同時孵化:

標準管0.05 ml葡萄糖標準溶液(1.0 mg/ml)加1.5ml試劑四,一式四份。

空白管0.05 ml緩沖液a乙酸鈉緩沖液(100 mM,pH 5.0)加CaCl25 mM)和1.5 ml試劑,一式兩份。

與樣品管和空白管同時50°C下培養(yǎng)20min;反應(yīng)結(jié)束后吸取200ul液體轉(zhuǎn)移至96孔板中,于510nm處讀數(shù);

10. 計算淀粉含量。

注:對于本提取方案,最終提取體積(EV=10.4   稀釋度(D=1、511

1如果樣品的吸光度值小于0.050步驟8中離心后吸取上清,無需再添加緩沖液稀釋;如果吸光度值大于0.60,吸取離心后上清,可以加入10ml緩沖液a進行稀釋(稀釋度(D=1、511)。

c) 不含抗性淀粉、D-葡萄糖和/或麥芽糊精的樣品總淀粉含量的測定

1. 碾磨谷物、植物或食品,使用0.5mm孔徑的篩網(wǎng)進行分篩;

2. 準確稱取100 mg待測樣品,一式兩份(一份作為空白)放入50ml離心管中

3. 向離心管中加入0.2ml 80%乙醇混合均勻,使樣品在離心管中均勻分散,該步驟非常重要;

4. 向離心管中添加3 ml稀釋后的試劑一(將試劑一用MOPS緩沖液(50 mM,pH 7.0含CaCl25 mM)稀釋30倍),離心管放入100℃沸水浴中孵育6min,在此期間需要間歇渦旋儀渦旋3-5充分混勻;

5. 離心管轉(zhuǎn)入50°C水浴鍋中,溫育5min;之后加入4 ml緩沖液b醋酸鈉緩沖液(200 mM,pH 4.5含CaCl25 mM),然后加入0.1ml試劑二,渦旋儀上渦旋混勻,并在50°C下培養(yǎng)30min;

6. 離心管中的全部內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到100 ml容量瓶中,緩沖液b醋酸鈉緩沖液(200 mMpH 4.5含CaCl25 mM定容100ml,并將瓶中液體混合;

7. 從容量瓶(樣品和空白中分別取出2.0 ml溶液轉(zhuǎn)移到5ml EP管中,以13000 rpm的轉(zhuǎn)速離心EP5min并靜置5min; 

8. 分別從5ml EP管(樣品和空白中吸取溶液0.05 ml到新的5ml EP管中;接著向管中加入1.5 ml 試劑四,輕輕混勻,50°C下培養(yǎng)20min;反應(yīng)結(jié)束后吸取200ul液體轉(zhuǎn)移至96孔板中,于510nm處讀數(shù);

同時孵化:

標準管0.05 ml葡萄糖標準溶液(1.0 mg/ml)加1.5 ml試劑四,一式四份。

空白管0.05 ml緩沖液a乙酸鈉緩沖液(100 mM,pH 5.0)加CaCl25 mM)和1.5ml試劑,一式兩份。

與樣品管和空白管同時50°C下培養(yǎng)20min;反應(yīng)結(jié)束后吸取200ul液體轉(zhuǎn)移至96孔板中,于510nm處讀數(shù);

9. 計算淀粉含量。

注:對于本提取方案,最終提取體積(EV=100  稀釋度(D=1

 

d) 含有抗性淀粉但不含D-葡萄糖和/或麥芽糊精的樣品總淀粉含量的測定

1. 碾磨谷物、植物或食品,使用0.5mm孔徑的篩網(wǎng)進行分篩;

2. 準確稱取100 mg待測樣品,一式兩份(一份作為空白)放入50ml離心管中;

3. 向離心管中加入0.2ml 80%乙醇混合均勻,使樣品在離心管中均勻分散,該步驟非常重要

4. 向離心管中加入2ml二甲基亞砜(DMSO),并在渦旋儀渦旋混勻,將離心管放入100℃沸水浴中處理5min,在此期間需要間歇渦旋儀渦旋3-5充分混勻;

5. 向離心管中添加3 ml稀釋后的試劑一(將試劑一用MOPS緩沖液(50 mM,pH 7.0含CaCl25 mM)稀釋30倍),離心管放入100℃沸水浴中孵育6min,在此期間需要間歇渦旋儀渦旋3-5充分混勻;

6. 離心管轉(zhuǎn)入50°C水浴鍋中,溫育5min;之后加入4 ml緩沖液b醋酸鈉緩沖液(200 mM,pH 4.5含CaCl25 mM),然后加入0.1ml試劑二渦旋儀上渦旋混勻,并在50°C下培養(yǎng)30min;

7. 離心管中的全部內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到100 ml容量瓶中緩沖液b醋酸鈉緩沖液(200 mM,pH 4.5含CaCl25 mM定容100ml,并將瓶中液體混合;

8. 從容量瓶(樣品和空白中分別取出2.0 ml溶液轉(zhuǎn)移到5ml EP管中,以13000 rpm的轉(zhuǎn)速離心EP5min并靜置5min; 

9. 分別從5ml EP管(樣品和空白中吸取溶液0.05 ml到新的5ml EP管中;接著向管中加入1.5 ml 試劑四,輕輕混勻,50°C下培養(yǎng)20min;反應(yīng)結(jié)束后吸取200ul液體轉(zhuǎn)移至96孔板中,于510nm處讀數(shù);

同時孵化:

標準管0.05 ml葡萄糖標準溶液(1.0 mg/ml)加1.5 ml試劑四,一式四份。

空白管0.05 ml緩沖液a乙酸鈉緩沖液(100 mM,pH 5.0)加CaCl25 mM)和1.5ml試劑,一式兩份。

與樣品管和空白管同時50°C下培養(yǎng)20min;反應(yīng)結(jié)束后吸取200ul液體轉(zhuǎn)移至96孔板中,于510nm處讀數(shù);

10. 計算淀粉含量。

注:對于本提取方案,最終提取體積(EV=100  稀釋度(D=1

1二甲亞砜作為皮膚刺激物,因此應(yīng)謹慎使用。它通過皮膚吸收,會對皮膚和眼睛造成刺激。使用時穿戴防護品并避免濺出溶劑,盡可能在通風(fēng)柜中使用。

 

e) 含有D-葡萄糖和/或麥芽糊精的樣品淀粉含量測定

乙醇洗滌去除D-葡萄糖和麥芽糊精

[注:麥芽糊精在乙醇水溶液中的溶解度主要取決于麥芽糊精的DP(聚合度)范圍、最終乙醇濃度和溶液溫度]。

1. 碾磨谷物、植物或食品,使用0.5mm孔徑的篩網(wǎng)進行分篩;

2. 準確稱取100 mg待測樣品,一式兩份(一份作為空白)放入50ml離心管中

3. 50ml離心管中加入5.0 ml 80%乙醇并在80-85°C下培養(yǎng)5分鐘,使用渦旋儀渦旋混勻溶液,并5 ml 80%乙醇;

4. 在臺式離心機上,以3250xg離心10min,去除上清,保留沉淀;

5. 向離心管中加入5 ml 80%乙醇中重懸沉淀,并使用渦旋儀渦旋混勻,再加入5ml 80%乙醇,倒置混合,按照步驟4再次離心,并小心地倒出上清液;

6. 向離心管中添加3 ml稀釋后的試劑一(將試劑一用MOPS緩沖液(50 mM,pH 7.0含CaCl25 mM)稀釋30倍)離心管放入100℃沸水浴中孵育6min,在此期間需要間歇渦旋儀渦旋3-5充分混勻

7. 離心管轉(zhuǎn)入50°C水浴鍋中,溫育5min;之后加入4 ml緩沖液b醋酸鈉緩沖液(200 mM,pH 4.5含CaCl25 mM),然后加入0.1ml試劑二,渦旋儀上渦旋混勻,并在50°C下培養(yǎng)30min;

8. 離心管中的全部內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到100 ml容量瓶中緩沖液b醋酸鈉緩沖液(200 mM,pH 4.5含CaCl25 mM定容100ml,并將瓶中液體混合;

8. 從容量瓶(樣品和空白中分別取出2.0 ml溶液轉(zhuǎn)移到5ml EP管中,以13000 rpm的轉(zhuǎn)速離心EP5min并靜置5min; 

9. 分別從5ml EP管(樣品和空白中吸取溶液0.05 ml到新的5ml EP管中;接著向管中加入1.5ml 試劑四輕輕混勻,50°C下培養(yǎng)20min;反應(yīng)結(jié)束后吸取200ul液體轉(zhuǎn)移至96孔板中,于510nm處讀數(shù);

同時孵化:

標準管0.05 ml葡萄糖標準溶液(1.0 mg/ml)加1.5 ml試劑四,一式四份。

空白管0.05 ml緩沖液a乙酸鈉緩沖液(100 mM,pH 5.0)加CaCl25 mM)和1.5ml試劑,一式兩份。

與樣品管和空白管同時50°C下培養(yǎng)20min反應(yīng)結(jié)束后吸取200ul液體轉(zhuǎn)移至96孔板中,于510nm處讀數(shù);

10. 計算淀粉含量。

注:對于本提取方案,最終提取體積(EV=100  稀釋度(D=1

 

f) 淀粉以可溶性或懸浮形式存在的樣品中淀粉含量的測定

1. 將液體樣品適量轉(zhuǎn)入50ml離心管中通過渦旋儀混勻,徹底混合樣品。可以加熱或使用均質(zhì)以獲得樣品的均勻懸浮液;

2. 使用移液器吸取100mg樣品轉(zhuǎn)入新的50ml離心管中,一式兩份(一份作為空白;

后續(xù)步驟于提取方案(a)中步驟3~步驟10相同。

        注:對于本提取方案,稀釋樣品體積(DSV=10.2 ml,稀釋度(D=1、511樣品體積(SV=5ml

 

g) 懸浮態(tài)含抗性淀粉樣品中淀粉含量的測定

1. 將液體樣品適量轉(zhuǎn)入50ml離心管中通過渦旋儀混勻,徹底混合樣品。可以加熱或使用均質(zhì)以獲得樣品的均勻懸浮液;

2. 使用移液器吸取100mg樣品轉(zhuǎn)入新的50ml離心管中,一式兩份(一份作為空白;

后續(xù)步驟于提取方案(b)中步驟3~步驟10相同。

注:對于本提取方案,釋樣品體積(DSV=12.2 ml稀釋度(D=1、511,樣品體積(SV=2 ml

計算:

1.固體樣品的計算(mg):

淀粉含量,% = ΔA × F×EV/0.1×1/1000×D×100/W×162/180

=ΔA ×F ×EV ×(D/W) x 0.90

其中:

ΔA=相當于試劑空白讀取的吸光光度值(反應(yīng)) ;       

F =吸光度值轉(zhuǎn)換為葡萄糖重量(ug)的因子(100ug D-葡萄糖的重量/100μg D-葡萄糖的吸光光度值);

EV=最終體積樣品提取量:流程a)為10.2 ml,流程b)為10.4ml,流程c)和(d)為100ml;                  0.1=用于檢測的樣品體積;      

D=樣品溶液的進一步稀釋倍數(shù)(未稀釋、稀釋5倍或稀釋11倍);    

1/1000=ugmg的轉(zhuǎn)換;

100/W=一定重量干粉中淀粉含量百分比;

162/180=淀粉中游離的D-葡萄糖轉(zhuǎn)化為D-葡萄糖的因子;               

淀粉含量,%(干重)=淀粉含量,%(上述算法結(jié)果) ×100/100-含水量,%)

 

2.液體樣品的計算(mg/100 ml):

淀粉  = ΔA×F ×(DSV/SV)×(100/0.1)×(1/1000×(162/180)×D

= ΔA × F×DSV/SV×0.9

ΔA=相當于試劑空白讀取的吸光光度值(反應(yīng)) ;       

F =吸光光度值轉(zhuǎn)換為葡萄糖重量(ug)的因子(100μg D-葡萄糖的重/100μg D-葡萄糖的吸光光度值);

DSV=稀釋樣品體積(即加入醋酸鹽緩沖液、α-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶后的樣品體積);

SV=分析用樣品的體積:流程f)為5 ml,流程g)為2 ml;  

100=換算成100ml樣品體積;

0.1=用于檢測的樣品體積;           

(1/1000=μgmg的轉(zhuǎn)換;

162/180=淀粉中游離的D-葡萄糖轉(zhuǎn)化為D-葡萄糖酐的的因子;               

D=樣品溶液的進一步稀釋(未稀釋稀釋5倍或稀釋11倍)     

淀粉(g/100g樣品)=mg/100ml×100/樣品干重(mg/ml)