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日本和光wako磷酸化蛋白研究方法——Phos-tag? SDS-PAGE

       Phos-tag 是一種能與磷酸離子特異性結(jié)合的功能性分子,結(jié)合特異性與氨基酸的種類和序列無關(guān),無放射性,無需特意制備磷酸化抗體。它可用于磷酸化蛋白的分離(Phos-tag Acrylamide)、Western Blot 檢測(cè)(Phos-tag Biotin)、蛋白純化 (Phos-tag Agarose)及質(zhì)譜分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag Mass Analytical Kit) Phos-tag? SDS-PAGE是使用了Phos-tagAcrylamide或SuperSepSDS-PAGE??赏ㄟ^條帶的遷移率差異,指示磷酸化蛋白的磷酸化水平。

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◆特點(diǎn)

SDS-PAGE的條帶根據(jù)蛋白的磷酸化水平變化

Phos-tag? 的支持文獻(xiàn)眾多


◆Phos-tag? SDS-PAGE的原理


1. SDS-PAGE膠中的Phos-tag捕獲磷酸化蛋白。

2. 電泳中的磷酸化蛋白的泳動(dòng)速度變慢。

3. 根據(jù)磷酸化水平出現(xiàn)在上移后的位置,分離出磷酸化蛋白的條帶。

Phos-tag由日本廣島大學(xué)研究生院 醫(yī)齒藥學(xué)保健研究科 醫(yī)藥分子功能科學(xué)研究室研發(fā)

Phos-tag是日本廣島大學(xué)研究生院 醫(yī)齒藥學(xué)保健研究科 醫(yī)藥分子功能科學(xué)研究室 小池透教授的登錄商標(biāo)。


Phos-tag日本廣島大學(xué)研究生院 醫(yī)齒藥學(xué)保健研究科 醫(yī)藥分子功能科學(xué)研究室公開了大量Phos-tag? SDS-PAGE的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可在以下網(wǎng)站查詢。

Phos-tag? SDS-PAGE 數(shù)據(jù)集:http://phostag.hiroshima-u.ac.jp/


已公開的數(shù)據(jù)中的蛋白名稱(截止20188月)


Abltide-GST

Erk1/2-2

Ovalbumin-3

Abltide-GST

inhibitor profiling

Erk2

p38 MAPK

Abltide-GST

Phosphatase assay

EvgS/EvgA-1

p42 MAPK

Abltide-GST

ATP-γS assay

EvgS/EvgA-2

p53

A-Raf

EnvZ

Pepsin-1

ArcB/ArcA

FANCI

Pepsin-2

ATF2

FixL/FixJ

Pepsin-3

ATM-1

GSK3β-1

PhoR/PhoB

ATM-2

GSK3β-2

PI3K p110β

53BP1

Histone H1

PKC zeta

BarA/UvrY

Histone H2A

Raptor

α-Casein-1

Histone H3-1

Rictor

α-Casein-2

Histone H3-2

SAPK/JNK

α-Casein-3

Histone H3-3

SHC-1

α-Casein-4

JAK2

SHC-2

β-Casein-1

JNK1/JNK3

SRF

β-Casein-2

JNK1/JNK2

STAT1

β-Casein-3

Jun

STAT3

β-Casein-4

Keratin8

STAT6

β-Casein-5

Keratin18

Tau

β-Catenin-1

LaminA/C

Tau

Tyr kinase assay -1

β-Catenin-2

MAPKAPK2

Tau

Tyr kinase assay -2

CDK2

mTOR

Tau

kinase assay_2D analysis

CHK1

MEK1-1

Thymosin β10

ClpX

MEK1-2

Vimentin-1

EGFR-1

Myelin Basic Protein-1

Vimentin-2

EGFR-2

Myelin Basic Protein-2

Vimentin

Elongation Factor 2

Ovalbumin-1

Erk1/2-1

Ovalbumin-2

◆產(chǎn)品列表

● 預(yù)制膠

用于Bio-Rad伯樂電泳儀


產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

孔數(shù)

電泳儀

包裝

198-17981

SuperSep? Phos-tag? (50 μmol/L), 7.5%,

17 well, 83×100×3.9 mm
Phos-tag? 預(yù)制膠50 μmol/L7.5%,

17孔,BioRad

17

Mini-PROTEAN?
Tetra Cell
(Bio-Rad Laboratories, Inc.)

5

195-17991

SuperSep? Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 17 well, 83×100×3.9 mm
Phos-tag? 預(yù)制膠50 μmol/L,12.5%,

17孔,BioRad

17

5

用于Life Technologies電泳儀

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

孔數(shù)

電泳儀

包裝

192-18001

SuperSep? Phos-tag? (50 μmol/L), 7.5%,

17 well, 100×100×6.6 mm
Phos-tag? 預(yù)制膠50 μmol/ L,7.5%,

17孔,Life Technologies

17

XCell SureLock?
 Mini-Cell
(Life Technologies, Inc.)

5

199-18011

SuperSep? Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 17 well, 100×100×6.6 mm
Phos-tag? 預(yù)制膠50 μmol/ L12.5%,

17孔,Life Technologies

17

5

用于Wako EasySeperator電泳儀

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

凝膠濃度

孔數(shù)

包裝

192-17401

SuperSep? Phos-tag? (50 μmol/L)
Phos-tag? 預(yù)制膠50 μmol/L

6.00%

13

5

199-17391

6.00%

17

5

195-17371

7.50%

13

5

192-17381

7.50%

17

5

193-16711

10.00%

13

5

190-16721

10.00%

17

5

195-16391

12.50%

13

5

193-16571

12.50%

17

5

193-16691

15.00%

13

5

196-16701

15.00%

17

5


SuperSep? 用電泳槽

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

包裝

058-07681

EasySeparator?Phos-tag預(yù)制膠的配套電泳槽

電泳用

1 set

◆相關(guān)產(chǎn)品

● 丙烯酰胺

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

廠家編號(hào)

包裝

300-93523

Phos-tag? Acrylamide AAL-107
Phos-tag? 丙烯酰胺

AAL-107M

2 mg

304-93521

AAL-107

10 mg

304-93526

Phos-tag? Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
Phos-tag? 丙烯酰胺5mM水溶液

AAL-107S1

0.3 mL