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Polyplus轉(zhuǎn)染試劑從體外到活體轉(zhuǎn)染核酸遞送方法全解析
        擁有超過20年的核酸轉(zhuǎn)染經(jīng)驗,Polyplus-transfection?的產(chǎn)品線覆蓋了生命科學研究,生物制品制造,基因和細胞治療以及活體轉(zhuǎn)染; 專業(yè)的技術(shù)和法規(guī)團隊,為客戶帶來全方位的支持。在生命科學研究領(lǐng)域,我們也提供了全面的轉(zhuǎn)染試劑,滿足您多樣化的轉(zhuǎn)染需求。

1.通用型DNA/siRNA轉(zhuǎn)染試劑jetPRIME?

2.用于難轉(zhuǎn)染細胞的jetOPTIMUS?

3.siRNA/miRNA轉(zhuǎn)染試劑INTERFER

4.mRNA轉(zhuǎn)染試劑 jetMESSENGER?

5.活體轉(zhuǎn)染試劑 in vivo jetPEI?

6.mRNA活體轉(zhuǎn)染試劑 in vivo jetRNA?

明星產(chǎn)品 jetPRIME? 高效轉(zhuǎn)染試劑 基于陽離子聚合物
更高效的轉(zhuǎn)染效率比脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率更高


根據(jù)說明書推薦步驟轉(zhuǎn)染,GFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后24小時FACS結(jié)果
操作步驟簡單,可以兼容血清和抗生素,轉(zhuǎn)染前后不用換液



性價比高 質(zhì)粒用量和轉(zhuǎn)染試劑用量小


把大象放進冰箱只需要一步:打電話叫來jetPRIME

jetOPTIMUS?: 最佳的DNA轉(zhuǎn)染試劑

      通常,貼壁細胞(如腫瘤細胞系等)比懸浮細胞(如淋巴細胞等)容易轉(zhuǎn)染;增殖速度快的細胞比處于靜止期的細胞容易轉(zhuǎn)染;而細胞系比原代細胞更易轉(zhuǎn)染。
為了提高轉(zhuǎn)染效率,Polyplus開發(fā)了最新代DNA轉(zhuǎn)染試劑jetOPTIMUS? 針對各種難轉(zhuǎn)染原代細胞和細胞系,如干細胞,原代細胞,神經(jīng)細胞及iPSC等,都能達到很高的轉(zhuǎn)染效率; 提高轉(zhuǎn)染效率的同時,jetOPTIMUS?還具有高性價比,使用更少量的轉(zhuǎn)染試劑和DNA。
轉(zhuǎn)染效率極高 優(yōu)于主要的競爭者


按照標準操作手冊 在幾種細胞系上進行轉(zhuǎn)染

更少的轉(zhuǎn)染試劑和DNA用量


同樣,基于陽離子聚合物 jetOPTIMUS?還具有毒性小、細胞活率高和操作方便兼容血清抗生素,轉(zhuǎn)染前后無需換液等優(yōu)點

非常溫和 能夠保持良好的細胞活率和細胞形態(tài)


按照標準操作手冊 在Vero細胞上進行轉(zhuǎn)染

更多jetOPTIMUS?在神經(jīng)細胞和干細胞中的案例分析, 請閱讀干細胞和神經(jīng)細胞轉(zhuǎn)染利器|且看jetOPTIMUS如何解決難轉(zhuǎn)染細胞問題干細胞轉(zhuǎn)染利刃:jetOPTIMUS?輕松解決難轉(zhuǎn)染細胞問題

INTERFERin?  更少的siRNA,更少的脫靶效應(yīng)

       一些文獻表明轉(zhuǎn)染低濃度的siRNA能夠避免脫靶效應(yīng)。確實,當轉(zhuǎn)染高濃度siRNA時,會觀察到這些非特異性的副作用。因此通過使用盡可能少的siRNA可以提高實驗數(shù)據(jù)的可靠性。INTERFERin? 專為此而設(shè)計:使用低濃度siRNA達到高效率基因沉默。


使用INTERFERin?遞送1 nM siRNA 就可以達到具有選擇性的高效基因沉默,而競爭產(chǎn)品需要至少10 nM siRNA來達到50%的基因沉默 (Fig. 1).

Fig. 1: INTERFERin? 僅需要1 nM siRNA達到有效的基因沉默

更加令人驚嘆的是, 使用10 pM siRNA 依然能達到50%的沉默效率 (Fig. 2).


Fig. 2. INTERFERin?在極低的 siRNA 濃度下也能達到高效基因沉默。A549-GL3Luc cells 在有血清的條件下使用INTERFERin? 轉(zhuǎn)染濃度逐步降低的 anti-Luc siRNA. 48小時后檢測Luciferase的表達. control siRNA沒有觀察到抑制效果


對多數(shù)貼壁細胞或原代細胞,1 nM siRNA能夠達到超過90%的基因沉默。對于懸浮細胞,使用5 nM siRNA依然能達到80%的沉默效率。

Table 1: 成功使用INTERFERin?達到高效基因沉默的細胞系

         在保持細胞活率方面,INTERFERin?優(yōu)于其他轉(zhuǎn)染試劑,能夠保持極佳的細胞活率。我們提供簡單即用的標準操作說明書,1nM的起始用量在大多數(shù)細胞中可達到有效的基因沉默。更多詳情請閱讀1nM? 10pM? siRNA高效基因沉默 更少用量 更少脫靶效應(yīng)

mRNA轉(zhuǎn)染試劑jetMESSENGER?

        DNA轉(zhuǎn)染要穿過兩層屏障,而mRNA轉(zhuǎn)染只需要穿過一層屏障,不需要穿過核膜,對細胞比較溫和;且mRNA輸送無需進入細胞核,與DNA轉(zhuǎn)染相比,消除了基因組整合的風險。


DNA 轉(zhuǎn)染 = 2層屏障 ,mRNA 轉(zhuǎn)染 = 1層屏障


對于原代細胞,神經(jīng)細胞等比較難轉(zhuǎn)染的細胞,使用jetMESSENGER?轉(zhuǎn)染mRNA能夠達到比較高的轉(zhuǎn)染效率。


jetMESSENGER? 用于難轉(zhuǎn)染細胞的mRNA轉(zhuǎn)染,效率高于主要的DNA轉(zhuǎn)染試劑

Fig. 1. jetMESSENGER? 轉(zhuǎn)染效率優(yōu)于主要的DNA轉(zhuǎn)染試劑競爭者。按照廠商建議條件在不同細胞中轉(zhuǎn)染編碼eGFP的mRNA  (5meC, pseudo-uridine, Trilink?) 或DNA。轉(zhuǎn)染24小時后用FACS檢測轉(zhuǎn)染效率。


jetMESSENGER? 在難轉(zhuǎn)染細胞中非常高效,相比于其他mRNA轉(zhuǎn)染試劑


Fig. 2. jetMESSENGER?相比主要競爭者有更高的轉(zhuǎn)染效率。在不同的難轉(zhuǎn)染細胞系中按照廠家建議條件使用 jetMESSENGER? or Lipofectamine? MessengerMAX?轉(zhuǎn)染eGFP mRNA (5meC, pseudo-uridine, Trilink?)。轉(zhuǎn)染后24小時用FACS檢測轉(zhuǎn)染效率。

更多相關(guān)信息,請閱讀干細胞和神經(jīng)細胞轉(zhuǎn)染利器|且看jetOPTIMUS如何解決難轉(zhuǎn)染細胞問題


活體轉(zhuǎn)染試劑 in vivo jetPEI?

       在體內(nèi)進行核酸遞送可使用病毒載體和非病毒轉(zhuǎn)染方法。病毒載體的遞送效率比較高且具有靶向性;但是使用病毒載體會引起一定的免疫反應(yīng),并且病毒載體生產(chǎn)周期較長,成本較高。


使用非病毒方法進行體內(nèi)核酸遞送具有以下優(yōu)點

  • 更加安全

  • 性價比更高

  • 使用便捷


       這里我們給大家介紹兩款活體轉(zhuǎn)染試劑,適用于任何動物模型的核酸轉(zhuǎn)染,操作簡便,僅需兩個步驟??蓾M足處于各個階段的客戶,包括從科學研究,到初期的工藝開發(fā),臨床前研究以及臨床試驗和商業(yè)化。可用于基因治療和疫苗。


       擁有大量成功經(jīng)驗,可以安全有效地在任何動物模型中遞送各種核酸類型,in vivo-jetPEI? 是最先進的活體轉(zhuǎn)染試劑。有超過700篇參考文獻,已經(jīng)被用作幾個藥物開發(fā)項目的遞送載體。正在進行的幾項用于癌癥治療,疫苗和免疫的臨床試驗使用最高質(zhì)量的GMP級 in vivo - jetPEI?。

多元化: 可用于任何動物模型和DNA, si/miRNA及其他各種核酸類型

       in vivo-jetPEI? 可在任何器官或組織中,通過基因過表達或者基因抑制的方法進行基因功能研究。它可以通過全身和局部注射目標多種器官。注射途徑在很大程度上決定了靶器官。例如,在靜脈注射時, in vivo-jetPEI?遞送的 DNA 主要在肺部表達,也在肝臟、胰腺、腎臟、脾臟、膀胱、心臟和動脈中表達。而腹腔注射,基因在卵巢、胰腺、膈肌、子宮和胃中表達 (Fig. 1)。為了實現(xiàn)器官特異性基因表達,可以結(jié)合細胞特異性啟動子和局部注射途徑,達到在特定器官/組織中的基因表達。

Fig. 1: 小鼠中使用in vivo-jetPEI?通過全身注射進行核酸遞送的靶向器官

使用便捷:兩步法操作

in vivo-jetPEI?使用便捷,和體外轉(zhuǎn)染類似,核酸和in vivo-jetPEI?混合后,直接注射到動物體內(nèi)(Fig. 2)。


Fig 2: in vivo-jetPEI? protocol in mice


質(zhì)量等級

       in vivo-jetPEI?有研發(fā)級用于基礎(chǔ)研究和實驗驗證,PC級可用于臨床前生物分布和毒理研究,GMP級 in vivo-jetPEI?是最高質(zhì)量等級的,符合人體臨床試驗的質(zhì)量要求。

mRNA活體遞送試劑 in vivo jetRNA?

       體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑是一種有效的,非病毒載體的核酸遞送試劑。它們易于使用,性價比高,被認為是RNA遞送的安全和高效的載體。mRNA轉(zhuǎn)染正迅速發(fā)展成為一種有前景的核酸治療方法。非病毒mRNA遞送方法已經(jīng)證明了在疫苗和癌癥治療方面的高效性。

Polyplus開發(fā)出一種用于體內(nèi)遞送mRNA的轉(zhuǎn)染試劑 — in vivo-jetRNA?。該試劑可以通過全身或局部注射,在不同的動物模型中目標多種器官。通過in vivo-jetRNA?遞送mRNA僅需兩個步驟,可用于疫苗接種、抗癌研究、CRISPR/Cas基因編輯及蛋白替換等多個領(lǐng)域。


       In vivo-jetRNA?能保護其有效荷載免受無處不在的核酸內(nèi)切酶降解,防止與蛋白質(zhì)的非特異性相互作用,并促進有效的進入細胞,這讓其成為使用不同給藥途徑將mRNA遞送至各器官的首選試劑。它介導的mRNA遞送可通過腹腔注射在多個器官中表達,尤其是在免疫反應(yīng)中起主要作用的脾臟和淋巴結(jié),以及肝臟、胰腺和子宮等其他器官。

Fig. mRNA / in vivo-jetRNA?復(fù)合物通過各種途徑注射小鼠后的生物分布

Fig. 小鼠腹腔注射mRNA/in vivo-jetRNA?復(fù)合物后的各器官分布

       in vivo-jetRNA?顯示了良好的耐受性和安全性。注射后所有動物均保持健康,沒有動物出現(xiàn)疼痛反應(yīng)。經(jīng)不同途徑進行mRNA/in vivo-jetRNA?復(fù)合物給藥后,靶器官形態(tài)完好,未見組織損傷。用作mRNA疫苗沒有出現(xiàn)毒性跡象,與病毒載體疫苗或抗原呈遞細胞(APC)肽相比,它對接受者更安全,生產(chǎn)更迅速,成本更低,而且它有巨大的潛力來應(yīng)對許多未被滿足的醫(yī)療需求。

產(chǎn)品訂購信息

產(chǎn)品

規(guī)格

緩沖液規(guī)格

貨號

jetOPTIMUs-最佳DNA轉(zhuǎn)染試劑,用于難轉(zhuǎn)染細胞

0.1 ml

2x10ml

101000051

0.75 ml

2x60ml

101000025

1.5 ml

4x60ml

101000006

jetPRIMEDNAand/orsiRNA轉(zhuǎn)染試劑

0.1 ml

5ml

101000027

0.75 ml

60ml

101000015

1.5 ml

2x60ml

101000046

5 x1.5 ml

10 x 60ml

101000001

INTERFERin*siRNA/miRNA轉(zhuǎn)染試劑

0.1 ml

 

101000036

1 ml

 

101000028

5x1ml

 

101000016

jetMESSENGERmRNA轉(zhuǎn)染試劑,用于難轉(zhuǎn)染細胞

0.1 ml

10ml

101000056

0.75 ml

60ml

101000005

jetPEIDNA高通量師選轉(zhuǎn)染試劑

1 ml

50ml

101000053

4x1ml

4x50ml

101000020

PULSin*蛋白,抗體,多膚轉(zhuǎn)染試劑,包含200ul陽性對照

0.4ml

20ml

101000010

NaCI150 mM 溶液

 

50ml

201000002

jetOPTIMUS*緩沖液

60ml

201000001

jetPRIME”緩沖液

60ml

201000003

in vivo-jetPEl體內(nèi)DNA&si/miRNA轉(zhuǎn)染試劑

0.1 ml

10ml

101000040

0.5 ml

2x10ml

101000030

in vivo-jetRNA-體內(nèi)mRNA轉(zhuǎn)染試劑

0.3 ml

2x10ml

101000013

1 ml

60ml

101000021

葡萄糖溶液

 

10ml

201000005


文章來源于Polyplus轉(zhuǎn)染專家