瑞士SpiroChrome公司的使命是為科學(xué)界提供符合這些標(biāo)準(zhǔn)的熒光探針。在沒有轉(zhuǎn)染、沒有光毒性、沒有繁瑣的洗滌流程(手冊)和沒有非特異性背景染色的情況下,對活細胞中的生物結(jié)構(gòu)進行成像。
基于發(fā)表在《自然化學(xué)》(Nature Chemistry)和《自然方法》(Nature Methods)上的兩篇具有里程碑意義的論文中介紹的一類新的熒光載體,我們開發(fā)了一系列試劑和探針,包括SiR-DNA、SiR-actin和SiR-tubulin,使 活細胞成像具有之前未有的分辨率和低背景。
我們將繼續(xù)開發(fā)創(chuàng)新工具,促進你們的研究。
技術(shù)背景
我們的技術(shù)是基于專利的熒光團硅羅丹明(SiR )。SIR是一種光亮、耐光的類羅丹明染料。其主要特點是細胞通透性、熒光性和與超分辨率顯微鏡的相容性。熒光激發(fā)和發(fā)射在活細胞成像實驗中呈遠紅色,降低了光毒性。SiR 與大多數(shù)顯微鏡兼容,因為它可以在標(biāo)準(zhǔn)Cy5設(shè)置下使用。所有這些特性的結(jié)合使基于SIR based的探針有別于其他熒光探針。請在《自然化學(xué)》的這篇論文中閱讀更多關(guān)于SiR的特性。
熒光探針用于細胞骨架的活細胞成像
我們的頭兩個明星產(chǎn)品是SiR -actin和SiR -tubulin,這是兩種用于細胞骨架活細胞成像的強力熒光探針。最近發(fā)表在《自然方法》上的一篇具有里程碑意義的論文中介紹了SiR-actin和SiR-tubulin。該探針具有極低的細胞毒性和極好的亮度,可用于肌動蛋白和微管蛋白的熒光成像。結(jié)合超分辨率顯微鏡,SiR-actin和SiR-tubulin以未有過的分辨率對細胞骨架進行活細胞成像。
SiR-actin和SiR-tubulin可以在不轉(zhuǎn)染和不洗滌的情況下使用。一項突出這些特征的實驗是使用簡單地在全血中添加SiR-actin來染色紅細胞的肌動蛋白纖維。此外,他們的遠紅激發(fā)和發(fā)射光譜使他們與基因編碼的表達兼容。
創(chuàng)建自己的基于SiR的探針
SiR衍生物存在于非熒光的螺內(nèi)酯(“關(guān)”態(tài))和熒光的兩性離子(“開”態(tài))之間的平衡中。SiR衍生物的聚集有利于“關(guān)閉”狀態(tài),而它們與極性蛋白表面的相互作用使熒光團進入“開啟”狀態(tài)。因此,基于sirbased的探針只有在與細胞目標(biāo)結(jié)合時才會產(chǎn)生熒光。通過將不同的配體偶聯(lián)到SiR上,例如使用我們的NHS酯或從游離酸開始,你現(xiàn)在可以創(chuàng)建自己的強力探針。有關(guān)配體所需特性的更多信息可以在這里找到。我們的化學(xué)家很樂意幫助你將配體轉(zhuǎn)化為含氟探針;請聯(lián)系我們進一步討論!
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