產(chǎn)品簡(jiǎn)介

2x濃度的FastStart Universal SYBR Green Master (Rox)預(yù)混液含有FastStart Taq DNA聚合酶、反應(yīng)緩沖液、核苷酸（dATP, dCTP, dGTP, dUTP）、SYBR Green I以及參考染料。

功能測(cè)試：每個(gè)批次都采用三種類(lèi)型模板對(duì)在qPCR中的性能進(jìn)行測(cè)試：高GC模板、高AT模板及長(zhǎng)片段模板（約440 bp）。FastStart Universal SYBR Green Master (Rox) 可用于任何DNA或cDNA靶標(biāo)的擴(kuò)增和檢測(cè)，包括那些具有高GC或AT的。

將預(yù)混液與Transcriptor First Strand cDNA合成試劑盒（Roche）結(jié)合以在兩步法qRT-PCR中實(shí)現(xiàn)極佳的結(jié)果。
? qRT-PCR[1][3][4][6][8]? qPCR[2][5][7][9]特點(diǎn)和好處? 改善PCR靈敏和特異性。最大限度減低非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的形成。? 避免對(duì)qPCR結(jié)果的過(guò)度預(yù)計(jì)。消除可增加量化的SYBR Green I結(jié)合量的非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物和引物二聚體。? 對(duì)一系列的DNA或cDNA靶標(biāo)進(jìn)行擴(kuò)增和檢測(cè)。擴(kuò)增最長(zhǎng)達(dá)500 bp的片段，包括高GC或高AT的。? 在qPCR制備中節(jié)省時(shí)間和工作。免去了降成分混合、優(yōu)化MaCl₂濃度或進(jìn)行其他耗時(shí)優(yōu)化優(yōu)化步驟的需要。? 防止來(lái)自殘留污染的假陽(yáng)性結(jié)果。使用這種含有dUTP的預(yù)混液配合尿嘧啶-DNA糖基化酶對(duì)來(lái)自之前PCR反應(yīng)的殘留DNA污染進(jìn)行清除。

一般的描述

SYBR Green I是一種DNA雙鏈特異性染料。在DNA合成的每個(gè)階段，包含在反應(yīng)液中的SYBR Green I染料可與擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物相結(jié)合；擴(kuò)增子可通過(guò)其熒光而被檢測(cè)到。熱啟動(dòng)的實(shí)驗(yàn)方法已被證明可顯著改善特異性、靈敏度及PCR的產(chǎn)量。在FastStart Taq DNA聚合酶的某些氨基酸殘基上的熱不穩(wěn)定性封閉基團(tuán)使得修改后的酶在室溫（+15至+25°C）沒(méi)有活性。因此，在引物可以非特異性結(jié)合的階段并沒(méi)有發(fā)生延伸。FastStart Taq DNA聚合酶可在高溫（如在+95°C的預(yù)孵育步驟）下通過(guò)將封閉基團(tuán)去除而被激活。在需要ROX進(jìn)行均一化的實(shí)時(shí)定量PCR系統(tǒng)上用于qPCR和RT-qPCR的通用即用型熱啟動(dòng)反應(yīng)預(yù)混液。FastStart Universal SYBR Green Master (Rox) 含有一種全新的參考染料，可使其能夠在所有需要使用ROX進(jìn)行均一化的實(shí)時(shí)定量PCR儀上進(jìn)行使用，而不需要對(duì)特定的儀器或?qū)嶒?yàn)方法進(jìn)行修改或調(diào)整。這種即用型的2x濃度預(yù)混液含有以SYBR Green I檢測(cè)形式進(jìn)行實(shí)時(shí)定量DNA檢測(cè)，包括qPCR和兩步法qRT-PCR所需的全部試劑（除了引物和模板）。FastStart Universal SYBR Green Master (Rox)可在諸如Applied Biosystems 7900 HT Fast Real-Time PCR或Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR系統(tǒng)這樣的儀器上生成極佳的結(jié)果。該產(chǎn)品不可用于LightCycler^?儀器。