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土壤錳過氧化物酶檢測(cè)試劑盒（微量法100T/48S）
| 貨號(hào) | SH0372 | 售價(jià)（元） | 1320 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0372 |
土壤錳過氧化物酶（Soil manganese peroxidase，S-Mnp）試劑盒（微量法100T/48S） |
100T/48S |
測(cè)定意義：
錳過氧化物酶（EC1.11.1.13）是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶，主要存在于擔(dān)子菌中，屬于木質(zhì)素降解酶系，能有效的降解木質(zhì)素及廢水和土壤中比較難降解的氯化物，疊氮化合物、DTT，多環(huán)芳烴等。
測(cè)定原理：
錳過氧化物酶在Mn2+存在的條件下，將愈創(chuàng)木酚氧化為四鄰甲氧基連酚，在465nm有特征吸收峰。
試劑組成和配制 ：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0372-100T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
12ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
2ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
4ml |
4℃避光 |
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試劑四：液體 |
2ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀、甲苯。
樣品處理：
新鮮土樣風(fēng)干，過30-50目篩。
測(cè)定步驟：
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對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
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土樣（mg） |
40 |
40 |
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甲苯（μl） |
30 |
30 |
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25℃，靜置15min |
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試劑一（μl） |
140 |
120 |
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試劑二（μl） |
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20 |
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試劑三（μl） |
40 |
40 |
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試劑四（μl） |
20 |
20 |
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充分混勻，于30℃震蕩反應(yīng)3h，于10000rpm，4℃離心10min，取150μl于微量石英比色皿/96孔板，測(cè)定465nm處吸光值，記為A對(duì)照管和A測(cè)定管，△A=A測(cè)定管- A對(duì)照管 |
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酶活計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
酶活性定義：每克土壤每天氧化1nmol愈創(chuàng)木酚所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。
S-MnP活性（nmol/d /g 土樣）= 
×V反總÷W÷T= 66.4×△A÷W
ε：愈創(chuàng)木酚摩爾消光系數(shù)：12100L/mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.2ml；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，3h
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
酶活性定義：每克土壤每天氧化1nmol愈創(chuàng)木酚所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。
S-MnP活性（nmol/d /g土樣）= 
×V反總÷W÷T= 132.8×△A÷W
ε：愈創(chuàng)木酚摩爾消光系數(shù)：12100L/mol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.2ml；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，3h