莫能菌素Monensin 細胞內(nèi)蛋白運輸?shù)囊种苿?/strong>
流式胞內(nèi)染色中最常用的活化細胞方法就是用一定濃度的PMA和Ionomycin刺激細胞4-6小時,同時加入蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑(通常是monensin或brefeldin A)阻止高爾基體將新分泌蛋白運輸?shù)郊毎猓瑥亩_到通過流式來檢測細胞因子的目的。
常見的蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑:Monensin莫能霉素, CAS NO:22373-78-0
產(chǎn)品簡介:莫能菌素是細胞內(nèi)蛋白運輸?shù)囊种苿?。莫能菌素在培養(yǎng)細胞中進行孵育會導(dǎo)致蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運到高爾基體(GC)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)中的蛋白質(zhì)積聚。在細胞體外活化的最后幾個小時內(nèi)添加莫能菌素可增強細胞內(nèi)細胞因子的檢測。莫能菌素可有效增強大多數(shù)小鼠和人類細胞內(nèi)細胞因子的檢測;但是,建議研究人員在其特定的測定系統(tǒng)中評估該試劑以及其他蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運抑制劑(例如布雷菲德菌素A)的用途和功效。
Brefeldin A(BFA,布雷非德菌素A), CAS NO:20350-15-6
產(chǎn)品簡介:一種常用的蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑,特異性地可逆地阻斷蛋白質(zhì)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)轉(zhuǎn)運到高爾基體(Golgi)。經(jīng)BFA處理,高爾基體很快被破壞并融合到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,該過程呈現(xiàn)能量、溫度和微管依賴性。BFA是一種真菌代謝物,最初曾用作抗病毒試劑,現(xiàn)主要用于研究蛋白轉(zhuǎn)運。BFA也常被用于抑制細胞因子等蛋白的分泌,并用于增強分泌蛋白的免疫染色檢測。BFA可激活神經(jīng)鞘磷脂循環(huán)(sphingomyelin cycle),還可誘導(dǎo)一些腫瘤細胞發(fā)生凋亡。
PMA 佛波肉豆蔻醋酸 CAS NO:16561-29-8
Phorbol 12-myristate 13-acetate( 佛波肉豆蔻醋酸) ,簡稱為PMA 也稱為TPA CAS NO 16561-29-8,一種廣泛用于體內(nèi)外實驗的佛波酯(phorbol ester )類PKC激舌劑。PMA可抑制Fas誘導(dǎo)的細胞凋亡,同時又可誘導(dǎo)HL-60細胞的周亡發(fā)生。PMA是一種強效的腫瘤促進劑能夠誘導(dǎo)小鼠皮膚瘤生成。常常與離子霉素Ionomycin 聯(lián)合刺激多種免疫細胞,以產(chǎn)生細胞因子。同時也與蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑如布雷非德菌素A( Brefeldin A ,) ,莫能霉素( Monensin ) 聯(lián)合使用抑制細胞因子外分泌,保留在細胞內(nèi)以準(zhǔn)確分析細胞因子表達水平。
實驗參考:
	 
						細胞因子 
					 
						克隆號 
					 
						靶向細胞 
					 
						刺激物 
					 
						刺激時間 
					 
						蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑 
					 
						表面標(biāo)志蛋白 
					 
						IL-2 
					 
						JES6-5H4 
					 
						Splenocytes 
					 
						PMA (20 ng/ml)
  plus ionomycin (1μg/ml) 
					 
						4-6 h 
					 
						monensin or
  brefeldin A 
					 
						CD3 
					 
						IL-3 
					 
						MP2-8F8 
					 
						Purified CD4+ T
  cells stimulated with immobilized **-CD3 (10 μg/ml) + soluble **-CD28 (2
  μg/ml) + IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 2 days, wash and then culture
  in IL-2 + IL-4 for 3-4 days 
					 
						PMA (20
  ng/ml)plusionomycin (1μg/ml) 
					 
						4-6 h 
					 
						monensin or
  brefeldin A 
					 
						CD4 
					 
						GM-CSF 
					 
						MP1-22E9 
					 
						Splenocytes
  stimulated with immobilized **-CD3 (10 μg/ml) + soluble **-CD28 (2 μg/ml) for
  2 days, wash and then culture in IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 3-4
  day 
					 
						PMA (20 ng/ml)
  plus ionomycin (1 μg/ml) 
					 
						4-6 h 
					 
						monensin or
  brefeldin A 
					 
						CD3 
					 
						IFN-γ 
					 
						XMG1.2 
					 
						Splenocytes 
					 
						PMA (20 ng/ml)
  plus ionomycin (1 μg/ml) 
					 
						4-6 h 
					 
						monensin or
  brefeldin A 
					 
						CD3 
					
	
		
			
 
				 
			
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
				 
			
				 
			
				 
			
				 
			
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
				 
			
				 
			
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
				 
			
				 
			
				 
			
				 
			
				 
			
				 
			
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
				 
			
				 
		
	
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
				 
			
相關(guān)產(chǎn)品:
| 
				 貨號  | 
			
				 產(chǎn)品名稱  | 
			
				 規(guī)格  | 
			
				 價格/元  | 
		
| 
				 WU047  | 
			
				 Monensin Solution (1,000×) 莫能霉素溶液(1,000×)  | 
			
				 1ml  | 
			
				 98  | 
		
| 
				 WU077  | 
			
				 Monensin, Sodium Salt 莫能霉素(鈉鹽)  | 
			
				 100mg  | 
			
				 460  | 
		
| 
				 WU060  | 
			
				 Ionomycin, Free Base 離子霉素(游離酸)  | 
			
				 1mg  | 
			
				 535  | 
		
| 
				 WU070  | 
			
				 Ionomycin, Free Base 離子霉素(游離酸)  | 
			
				 5mg  | 
			
				 1720  | 
		
| 
				 WU072  | 
			
				 Ionomycin, Calcium Salt 離子霉素(鈣鹽)  | 
			
				 1mg  | 
			
				 535  | 
		
| 
				 WU074  | 
			
				 Ionomycin, Calcium Salt 離子霉素(鈣鹽)  | 
			
				 5mg  | 
			
				 1720  | 
		
| 
				 WU045  | 
			
				 Brefeldin A (BFA, 5mg/ml) 布雷非德菌素A(5mg/ml)  | 
			
				 200μl  | 
			
				 410  | 
		
| 
				 WU065  | 
			
				 Brefeldin A (BFA, 5mg/ml) 布雷非德菌素A(5mg/ml)  | 
			
				 1ml  | 
			
				 1500  | 
		
| 
				 WU085  | 
			
				 Brefeldin A (BFA, Powder) 布雷非德菌素A(粉末)  | 
			
				 5mg  | 
			
				 1200  | 
		
| 
				 WU061  | 
			
				 PMA (TPA, 5mg/ml) 佛波肉荳蔻醋酸(5mg/ml)  | 
			
				 200μl  | 
			
				 445  | 
		
| 
				 WU062  | 
			
				 PMA (TPA, Powder) 佛波肉荳蔻醋酸(粉末,超純)  | 
			
				 5mg  | 
			
				 1780  | 
		
| 
				 WU055  | 
			
				 Calcium Ionophore A23187鈣離子載體  | 
			
				 1mg  | 
			
				 320  | 
		
保存與運輸方法
保存:-20°C避光保存2年有效。運輸:冰袋運輸。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。